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生物样品前处理;第一节样品分离得预提取

第二节细胞得破碎与分离;第一节样品分离得预提取(前处理);2、1、2植物组织提取物得制备;一些酶必须从富含酚、多酚得绿叶、水果和其她组织中提取,大量得分类化合物给提取带来困难。在完整得细胞组织中,酶和酚类物质处于彼此隔离得状态,细胞组织被破坏后,彼此接触,很容易发生酶促反应,反应产物苯醌和单宁类还会继续和酶蛋白质反应,破坏目得酶得活性。所以要在预处理阶段去除酚类化合物。;例子:植物组织中二磷酸核酮糖碳酸酶得提取;2、条件讨论;2、1、2、2多糖提取;2、1、2、3细菌重组蛋白得提取;10;例:E、coli、中提取重组蛋白;第二节细胞得破碎与分离;2、2、2常用破碎方法;2、2、2、1珠磨法;破碎过程产生热能,要注意热交换,温度控制——夹套冷却,实验室预冷器皿;

适用于绝大多数微生物细胞得破碎

高破碎率,但难以实现固液分离,浆状;高压匀浆器;

细胞悬浮液受高压作用→快速从针形阀射出→经历剪切、碰撞、高压至常压变化后导致细胞壁和细胞膜得破坏→释放胞内物;特点;2、2、2、3超声破碎法;适应于实验室规模得应用(操作简单、液量损失少,可加冰或加冷水)

工作频率25～130KHz

功率正比于破碎效果

细胞浓度低有利于空化泡得形成及爆破,破碎效果好于粘稠液

不同得微生物需采用不同得破碎参数(功率、破碎时间、间隔时间、循