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培养基的制备08课件讲解.pptx

培养基的制备

培养基制备实训目标熟悉培养基制备的基本程序会制备常用的培养基仪器材料高压蒸气灭菌器、电炉、天平、量筒、漏斗、试管、培养皿、烧杯、三角烧瓶等0102

一、培养基是由人工方法配制而成的，专供微生物生长繁殖使用的营养基质。二、培养基的种类和功能细菌培养制作培养基

培养基种类特点用途液体培养基不加凝固剂生化试验、工业生产半固体培养基加凝固剂，如琼脂0.3-0.5%观察微生物的运动、有无鞭毛、分类鉴定固体培养基加凝固剂如琼脂1.5-2.0%微生物分离、纯化、鉴定、活菌计数、保藏菌种细菌培养制作培养基

细菌培养制作培养基三、制备培养基的步骤计算称量溶化调PH分装灭菌摆斜面或倒平板

细菌培养制作培养基三、制备培养基的步骤(以制备营养琼脂平板为例）

1．计算：1000ml蒸馏水中应加营养琼脂粉31.3g，根据培养基的需要量确定营养琼脂粉的用量。营养琼脂粉的量=31.3×15×n/1000（g）其中：15：代表一个平板需要营养琼脂约15ml；n：代表要做的培养基平板的数量。

细菌培养制作培养基2．称量：用天平准确称量营养琼脂粉的量，用量筒量取相应体积蒸馏水，混匀。

3．溶化：将营养琼脂和蒸馏水倒入搪瓷缸中，于电炉上加热溶化，边加热边搅拌，沸腾时立即从电炉上拿下，等泡沫消失后再放在电炉上加热，注意不能让琼脂溢出，煮沸2—3次。细菌培养制作培养基

4.调节pH值培养基溶解均匀并冷却至室温时，用pH试纸测pH，然后按要求加酸或碱（一般用1mol/L盐酸或氢氧化钠），要缓慢少量且多加搅拌。细菌培养制作培养基

5.分装将培养基分装入试管或三角瓶内，固体培养基要趁热装。分装时要避免培养基粘染管（瓶）口，引起污染。分装量如下：

①试管斜面：装量为管长的1/4-1/5。

②试管液体培养基、高层培养基（固体培养基的一种）、半固体培养基：装载量不超过管长的1/3。

③三角瓶：装量不超过容积1/2。细菌培养制作培养基

6.灭菌包扎，灭菌：高压蒸汽灭菌，普通培养基为121℃、20min。后处理：斜面固体培养基（灭菌后立即摆放成斜面，斜面长度一般以不超过试管长度的1/2为宜）；平板培养基（倒于培养皿中，每板约15ml左右，以刚好覆盖平皿底为易）；半固体培养基（垂直冷凝成半固体深层琼脂）。细菌培养制作培养基

细菌培养制作培养基7．备用将合格的培养基放入冰箱，在0-4℃中保存备用。