CN110352238A 诱导性多能干细胞的制作方法 （田边刚士）.docxVIP

(19)中华人民共和国国家知识产权局

(12)发明专利申请

(10)申请公布号CN110352238A

(43)申请公布日2019.10.18

(21)申请号201880013637.0

(22)申请日2018.02.22

(30)优先权数据

62/463,4202017.02.24US

(85)PCT国际申请进入国家阶段日

2019.08.23

(86)PCT国际申请的申请数据

PCT/JP2018/0065882018.02.22

(87)PCT国际申请的公布数据

WO2018/155595JA2018.08.30

(71)申请人田边刚士

地址美国加利福尼亚州帕罗奥图市申请人爱平世股份有限公司

(72)发明人田边刚士须藤健太下田英范布兰登·凯莉

(74)专利代理机构北京铭硕知识产权代理有限公司11286

代理人杨敏金玉兰

(51)Int.CI.

C12N5/07(2006.01)

权利要求书2页说明书16页附图21页

(54)发明名称

诱导性多能干细胞的制作方法

(57)摘要

CN110352238A根据本公开，提供一种诱导性多能干细胞的制作方法，其包含：准备体细胞的步骤；将含有启动因子RNA的仙台病毒导入至体细胞的步骤。而且，根据本公开，提供一种诱导性多能干细胞的制作方法，其包含：准备体细胞的步骤；使用RNA转染试剂将启动因子RNA导入至体细胞的步骤；

CN110352238A

附着培养

悬浮培养

HDF:2443

附着培养

GFP

悬浮培养

悬浮培养

GFP

CN110352238A权利要求书1/2页

2

1.一种诱导性多能干细胞的制作方法，其包含：

准备体细胞的步骤；及

将含有启动因子RNA的仙台病毒导入至所述体细胞的步骤。

2.根据权利要求1所述的诱导性多能干细胞的制作方法，其中，

将所述含有启动因子RNA的仙台病毒导入至在凝胶培养基中悬浮培养的所述体细胞。

3.根据权利要求1所述的诱导性多能干细胞的制作方法，其中，

将所述含有启动因子RNA的仙台病毒导入至附着培养的所述体细胞。

4.根据权利要求1至3中任一项所述的诱导性多能干细胞的制作方法，其进一步包含在凝胶培养基中对所述体细胞进行初始化的步骤。

5.根据权利要求1至4中任一项所述的诱导性多能干细胞的制作方法，其中，所述体细胞为纤维母细胞。

6.根据权利要求1至4中任一项所述的诱导性多能干细胞的制作方法，其中，所述体细胞为血液细胞。

7.根据权利要求6所述的诱导性多能干细胞的制作方法，

其进一步包含使用红血球分离剂，分离单核细胞作为所述体细胞的步骤。

8.根据权利要求6所述的诱导性多能干细胞的制作方法，

其进一步包含使用过滤器，分离单核细胞作为所述体细胞的步骤。

9.根据权利要求6所述的诱导性多能干细胞的制作方法，

其进一步包含使用免疫磁珠，分离单核细胞作为所述体细胞的步骤。

10.根据权利要求1至9中任一项所述的诱导性多能干细胞的制作方法，其中，

所述启动因子RNA包含M?0或OCT3/4的mRNA、SOX2的mRNA、KLF4的mRNA、及c-MYC的mRNA。

11.根据权利要求2或4所述的诱导性多能干细胞的制作方法，其中，并不对所述凝胶培养基进行搅拌。

12.根据权利要求2或4所述的诱导性多能干细胞的制作方法，其中，所述凝胶培养基不含生长因子。

13.根据权利要求2或4所述的诱导性多能干细胞的制作方法，其中，所述凝胶培养基以40质量%以下的浓度含有生长因子。

14.根据权利要求2或4所述的诱导性多能干细胞的制作方法，其中，所述凝胶培养基不含bFGF。

15.一种诱导性多能干细胞的制作方法，其包含：准备体细胞的步骤；

使用RNA转染试剂将启动因子RNA导入至所述体细胞的步骤；及在凝胶培养基中对所述体细胞进行初始化的步骤。

16.根据权利要求15所述的诱导性多能干细胞的制作方法，其中，所述体细胞为纤维母细胞。

17.根据权利要求15所述的诱导性多能干细胞的制作方法，其中，所述体细胞为血液细胞。

18.根据权利要求17所述的诱导性多能干细胞的制作方法，

其进一步包含使用红血球分离剂，分离单核细胞作为所述体细胞的步骤。

CN110352238A权利要求书2/2页

3

19.根据权利要求17所述的诱导性多能干细