CN1987439A 适用于量热式农药快速检测的生物敏感元件及其制作方法 （上海理工大学）.docxVIP

[19]中华人民共和国国家知识产权局

[12]发明专利申请公布说明书

[21]申请号200610147245.2

[51]Int.Cl.

GO1N25/20(2006.01)

GO1N33/48(2006.01)

[43]公开日2007年6月27日[11]公开号CN1987439A

[22]申请日2006.12.14

[21]申请号200610147245.2

[71]申请人上海理工大学

地址200093上海市杨浦区军工路516号[72]发明人徐斐姜觅胥义华泽钊

马天画

[74]专利代理机构上海申汇专利代理有限公司代理人吴宝根

权利要求书1页说明书6页附图1页

[54]发明名称

适用于量热式农药快速检测的生物敏感元件及其制作方法

[57]摘要

本发明公开了一种适用于量热式农药快速检测的生物敏感元件及其制作方法，其特点是该生物敏感元件由从动植物体中提取的B-酯酶和从蔬菜中提取的酚氧化酶组成，制作方法步骤为：1)酶液的

反应时间(S)

200610147245.2权利要求书第1/1页

2

1、一种适用于量热式农药快速检测的生物敏感元件及其制作方法，其特点是该生物敏感元件由从动植物体中提取的B-酯酶和从蔬菜中提取的酚氧化酶组成，制作方法步骤为：

1)酶液的提取

动物组织按1:3的比例加入pH中性的缓冲液，进行组织破碎；或植物组织干磨碎后按1:5的比例加入pH中性的缓冲液，进行搅拌提取；离心分离得B-酯酶粗酶液；蔬菜原料按1:1的比例加入pH中性的缓冲液，进行组织破碎、离心分离得酚氧化酶粗酶液；

2)酶的部分纯化

用30%和80%饱和度的硫酸铵溶液依次对B-酯酶粗酶液和酚氧化酶粗酶液进行分级沉淀，之后用超滤除去小分子盐；

3)酶的固定化

将部分纯化的B-酯酶酶液和酚氧化酶酶液按1:4~1:10的活力比例混合，与处理好的OH型阴离子交换树脂一起搅拌固定，4-5小时后，用蒸馏水洗去未固定上的酶液，将洗净的固定化酶存于中性缓冲液中待用。

200610147245.2说明书第1/6页

3

适用于量热式农药快速检测的生物敏感元件及其制作方法

技术领域

本发明涉及一种适用于量热式农药快速检测的生物敏感元件及其制作方法，属农药快速检测领域。

背景技术

目前，国内外研究的快速检测农药残留的方法主要有：酶联免疫吸附分析法、酶片法(速测卡法)、农药残留分光光度计法和生物传感器法等。这些方法大多是通过检测酶催化反应得到的电化学活性物质或有色物质的多少，来反映样品中的农药残留的高低。然而，由于食品样品的组分多样性，这种方法容易受样品中其他电化学活性物质或光学物质的干扰，造成结果的不准确性。

利用生化反应过程中普遍伴随的热量变化，采用量热的方式来进行分析，具有通用性强、适用于大多数生化样品、在测量时不受其他电化学活性物质或光学物质的干扰等优点。然而，由于生化反应产生的热量往往比较小，难以测量。因此，目前国内外在检测农药方面，很少采用量热式的方法。

本申请人曾基于量热原理，于2002年11月获得了一项名为“一种探测农药残留用的量热式生物传感器”的实用新型专利 (CN2519909)。该专利装置主要由参考酶柱、检测酶柱、流动单元

200610147245.2说明书第2/6页

4

和检测单元组成，通过检测两酶柱出口液体的温度差和标定，获知样液中的农药残留高低。但也由于利用的胆碱酯酶催化的生化反应放出热量过小，增加了检测难度，降低了检测准确度。

发明内容

本发明的目的是为了克服现有快速检测农药残留方法中，由于食品样品的组分多样性，容易受样品中其他电化学活性物质或光学物质的干扰，造成结果的不准确性的缺点，提供一种生化反应产生的热量大，易测量的适用于量热式农药快速检测的生物敏感元件及其制作方法。

本发明的技术方案是：一种适用于量热式农药快速检测的生物敏感元件及其制作方法，其特点是，所述的生物敏感元件由从动植物体中提取的