生物氧化课件.pptVIP

底物水準磷酸化(substratelevelphosphorylation)與脫氫反應偶聯，生成底物分子的高能鍵，使ADP(GDP)磷酸化生成ATP(GTP)的過程。不經電子傳遞。氧化磷酸化(oxidativephosphorylation)是指在呼吸鏈電子傳遞過程中偶聯ADP磷酸化，生成ATP，又稱為偶聯磷酸化。ATP生成方式一、氧化磷酸化偶聯部位在複合體Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ內根據P/O比值自由能變化:⊿Go=-nF⊿Eo氧化磷酸化偶聯部位：複合體Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ線粒體離體實驗測得的一些底物的P/O比值底物呼吸鏈的組成P/O比值可能生成的ATP數β-羥丁酸NAD+→複合體Ⅰ→CoQ→複合體Ⅲ2.52.5→Cytc→複合體Ⅳ→O2琥珀酸複合體Ⅱ→CoQ→複合體Ⅲ1.51.5→Cytc→複合體Ⅳ→O2抗壞血酸Cytc→複合體Ⅳ→O20.881細胞色素c(Fe2+)複合體Ⅳ→O20.61-0.681（一）P/O比值指氧化磷酸化過程中，每消耗1/2摩爾O2所生成ATP的摩爾數（或一對電子通過氧化呼吸鏈傳遞給氧所生成ATP分子數）。（二）自由能變化根據熱力學公式，pH7.0時標準自由能變化(△G0′)與還原電位變化(△E0′)之間有以下關係：n為傳遞電子數；F為法拉第常數(96.5kJ/mol·V)△G0′=-nF△E0′電子傳遞鏈自由能變化ATPATPATP氧化磷酸化偶聯部位NADHFMN(Fe-S)琥珀酸FAD(Fe-S)CoQCytb→Cytc→CytcCytaa3O2二、氧化磷酸化偶聯機制是產生跨線粒體內膜的質子梯度化學滲透假說(chemiosmotichypothesis)電子經呼吸鏈傳遞時，可將質子(H+)從線粒體內膜的基質側泵到內膜胞漿側，產生膜內外質子電化學梯度儲存能量。當質子順濃度梯度回流時驅動ADP與Pi生成ATP。氧化磷酸化依賴於完整封閉的線粒體內膜；線粒體內膜對H+、OH－、K＋、Cl－離子是不通透的；電子傳遞鏈可驅動質子移出線粒體，形成可測定的跨內膜電化學梯度；增加線粒體內膜外側酸性可導致ATP合成，而線粒體內膜加入使質子通過物質可減少內膜質子梯度，結果電子雖可以傳遞，但ATP生成減少。化學滲透假說已經得到廣泛的實驗支持。線粒體基質線粒體膜++++----H+O2H2OH+e-ADP+PiATP化學滲透假說簡單示意圖ⅢⅠⅡⅣF0F1CytcQNADH+H+NAD+延胡索酸琥珀酸H+1/2O2+2H+H2OADP+PiATP4H+2H+4H+胞液側基質側++++++++++---------電子傳遞過程複合體Ⅰ(4H+)、Ⅲ(4H+)和Ⅳ(2H+)有質子泵功能。化學滲透示意圖及各種抑制劑對電子傳遞鏈的影響三、質子順濃度梯度回流釋放能量用於合成ATPF1：親水部分（動物：α3β3γδε亞基複合體，OSCP、IF1亞基），線粒體內膜的基質側顆粒狀突起，催化ATP合成。F0：疏水部分（ab2c9~12亞基，動物還有其他輔助亞基），鑲嵌線上粒體內膜中，形成跨內膜質子通道。ATP合酶結構組成ATP合酶組成可旋轉的發動機樣結構F0的2個b亞基的一端錨定F1的α亞基，另一端通過δ和α3β3穩固結合，使a、b2和α3β3、δ亞基組成穩定的定子部分。部分γ和ε亞基共同形成穿過α3β3間中軸，γ還與1個β亞基疏鬆結合作用，下端與嵌入內膜的c亞基環緊密結合。c亞基環、γ和ε亞基組成轉子部分。質子順梯度向基質回流時，轉子部分相對定子部分旋轉，使ATP合酶利用釋放的能量合成ATP。