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刺葡萄VdERD6L15基因克隆及功能分析.pdf

果树学报2024，41（9）：1770-1780

JournalofFruitScience

DOI:10.13925/ki.gsxb

刺葡萄VdERD6L15基因克隆及功能分析

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刘洁，杨盛迪，曾雅婷，白描，杨国顺，李双江

（湖南农业大学园艺学院·湖南省葡萄工程技术研究中心，长沙410128）

摘要：【目的】探究VdERD6L15在刺葡萄果实生长发育中的功能，从湘刺1号中克隆VdERD6L15基因及其启动子，进

行基因功能研究和启动子活性分析。【方法】克隆VdERD6L15基因CDS序列，并对CDS进行生物信息学分析；构建

VdERD6L15表达载体，并通过瞬时转化烟草确定VdERD6L15基因编码蛋白的亚细胞定位；同时，通过在己糖缺陷型

酵母菌株EBY.VW4000中异源表达VdERD6L15探究其功能；此外，通过启动子截短试验确定VdERD6L15启动子的核

心区域。【结果】成功克隆刺葡萄VdERD6L15基因编码序列，该编码序列长1461bp，可编码486个氨基酸，具有膜蛋白

特征，属于单糖转运蛋白家族。亚细胞定位试验确认VdERD6L15蛋白主要定位于液泡膜上。通过在酵母菌株EBY.

VW4000中进行异源表达，验证了VdERD6L15具有转运葡萄糖的能力。利用PlantCARE数据库对VdERD6L15启动

子顺式作用元件进行分析，发现其主要包含光响应元件、干旱胁迫和激素响应元件。通过GUS染色分析，进一步确定

候选基因VdERD6L15启动子的关键调控区域位于-500bp到-1000bp之间。【结论】VdERD6L15是一个定位在液泡膜

上的糖转运蛋白，具有转运葡萄糖的功能；VdERD6L15启动子的核心元件位于ATG上游500~1000bp之间。

关键词：刺葡萄；VdERD6L15；单糖转运蛋白；亚细胞定位；启动子活性

中图分类号：S663.1文献标志码：A文章编号：1009-9980(2024)09-1770-11

CloningandfunctionalanalysisoftheVdERD6L15geneinVitisdavidii

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LIUJie,YANGShengdi,ZENGYating,BAIMiao,YANGGuoshun,LIShuangjiang

(CollegeofHorticulture,HunanAgriculturalUniversity/HunanEngineeringandTechnologyResearchCenterforGrapes,Changsha

410128,Hunan,China)

Abstract:【Objective】VitisdavidiiFoëx.isakeywildgrapegermplasmresourceinsouthernChina,

thesugarsintheV.davidiiberryaremainlyaccumulatedintheformofglucoseandfructoseinthevacu-

oleduringtheripeningperiod,andthisprocessismainlyregulatedbysugartransporterproteins.The