第一部分　专题八　热点聚焦　PCR技术及应用.docxVIP

热点聚焦PCR技术及应用

热点1PCR引物归类分析

1．引物的设计

(1)(2020·山东，25节选)通过PCR技术可在总cDNA中专一性地扩增出Wx基因的cDNA，原因是________________________________________________________________________

________________________________________________________________________。

答案引物是根据Wx基因的一段已知序列设计合成的(或引物能与Wx基因的cDNA特异性结合)

(2)(经典高考题)设计引物时需要避免引物之间发生__________，而造成引物自连。同理也要避免引物之间的互补。复性温度的设定与引物长度、碱基组成有关，长度相同且________的引物需要设定更高的复性温度。

答案碱基互补配对G、C含量高

[命题延伸]判断与填充

(1)PCR技术中，提高复性的温度能有效减少反应非特异条带的产生(2021·湖北，16)(√)

(2)科学设计引物是PCR能否成功的关键，若引物的碱基过多或引物的G、C含量过高，会造成PCR的效率偏低，收获的目的基因较少，原因是引物与模板链结合过于紧密，变性时引物不易与模板链脱离(影响变性)。若对PCR产物进行琼脂糖凝胶电泳检测，结果发现有两个或多个条带，从