（共80页PPT）解题策略3　基因工程的操作思路与现实意义.pptx

;;一基因工程“工具”的种类、作用与选择依据;??????????

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通常,使用单一的限制酶切割目的基因和载体时,会使被切割DNA两端产生完全相同的

单链突出端,在连接过程中,任何相同的突出端在DNA连接酶的催化下均可发生连接,;除可产生质粒载体的自身连接,也可产生质粒载体与目的基因的连接,但质粒载体与目

的基因的连接也可能发生在二者的任何突出端,即二者连接无确定的方向,进而增加目

的基因插入载体的方向上的错误率,这些都会降低目的基因插入质粒载体的准确率。

因此,在无特殊原因情况下,通常不选择使用单酶切方法实现目的基因插入质粒载体。

相比之下,双酶切会使DNA两端产生序列不同的突出端