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- 2026-04-25 发布于浙江
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8.8亲和膜分离AffinityMembraneSeparation;过程:吸附、淋洗、洗脱、再生。
多采用错流方式,达到分离与浓缩之双重目的。
该技术的关键是适宜的亲和膜制备。
膜污染等导致吸附效率低、膜寿命下降是其主要问题。
优点:分子识别功能、分离效率高,通量大、纯化+浓缩,操作方便,设备简单,便于大规模生产。如以葡萄球菌A蛋白为配基的亲和膜,全自动分离纯化系统可一步完成除菌、纯化和浓缩操作,用于纯化小鼠单抗的速度可达传统层析法的100倍。
应用:制取白蛋白、单克隆抗体、干扰素、纤维蛋白、葡聚糖、胰蛋白酶及其抑制剂。;特点:与亲和色谱相比;2.亲和膜的作用机理;亲和络合:将混合物缓慢地通过膜,使要分离的物质与亲和配基产生特异性作用,形成配基与配位物(Ligate)的复合体;
洗脱:改变条件(洗脱液组成、pH、离子强度、温度等),使复合物解离;
亲和膜再生:洗涤、再生、平衡,以备下次操作使用;3.亲和膜制备;B.配基的选择;D.亲和膜制备主要包括2步:
(1)活化载体:即通过适当的化学反应,在膜表面接上可反应的官能团或者是一定长度的“间隔臂”。
(2)偶联配基:配基与底物常用的结合方法有:溴化氢法、环氧法、羰基二咪唑法、高碘酸盐法、碳二亚胺法、金属螯合法。;例
将水解后的尼龙66微孔膜用二溴丙烷活化,接上己二胺作间隔臂,再用戊二醛法固载上组氨酸,
制得的亲和膜可成功地除
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