蛋白质电泳检测技术全解析.pptxVIP

蛋白质电泳技术介绍(jièshào);SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳SDS

(polyacrylamidegelelectrophoresis，PAGE);基本原理;图解(tújiě);多孔凝胶;操作(cāozuò)流程;制胶

1将玻璃板用蒸馏水洗净晾干，把玻璃板在灌胶支架上固定好

2按照(ànzhào)配方制备分离胶，TEMED在灌胶前加入混匀，快速灌胶

3在分离胶上快速并轻柔的加上水或无水乙醇进行水封（凝胶聚合好的标志是胶与水层之间形成清楚的界面）

4倒出水并用滤纸把剩下的水分吸干,按百分比配好浓缩胶,连续平稳加入浓缩胶至离边缘5mm处,快速插入样梳,静置40分钟;上样

按一定次序在加样孔中加入样品，依据SDS电泳(diànyǒnɡ)玻璃板

间隙厚度不同，选择加入样品量。

电泳(diànyǒnɡ)

打开电源将电压调到80v（普通15min左右），待样品跑过压

缩胶后将电压调到120v至样品电泳(diànyǒnɡ)到胶底部为止。;染色

将凝胶小心取下放入容器中，加入染色液（考马斯亮蓝

），用摇床摇2－3h

脱色

待条带清楚(qīngxī)后倒出染色液，加入脱色液过夜。将脱色液倒掉

，能够用QualityOne，或者相应的成像系统拍照、分析、

估算蛋白浓度。;等电聚焦(jùjiāo)电泳

(IsoelectrofocusingIEForEF);等电聚焦电泳