转基因动物课件.pptVIP

5.移植將胚胎移植到假孕的代孕母鼠子宮內，繁育轉基因小鼠。（6）獲得純合的轉基因鼠優點：整合率高同源重組實現定點整合，而非隨機整合缺點：不容易建立胚胎幹細胞系長期培養，導入外源基因的胚胎幹細胞會由於細胞分化使生產的動物成為嵌合體第一代是嵌合體，獲得轉基因動物的週期較長4.精子載體導入法將外源DNA與破壞細胞膜的精子一起孵育，精子可捕獲外源DNA，並通過受精過程將外源DNA導入受精卵。義大利Lavitrano等1989年首次報導利用精子作為載體獲得了轉基因小鼠。改進的方法是精子頭部纖維注射此法不僅可免去複雜而昂貴的設備，且可省去不少繁雜的操作和條件準備。但該法有些結果不穩定，不能重複,外源DNA分子可能會受到受精液中內切酶的作用而影響整合後的功能需在繼續改進5.基因打靶(genetargeting)包括基因敲除(Knock-out)：靶基因被滅活.無功能的外源基因轉入細胞與基因組中同源序列進行同源重組，把具有功能的同源序列置換出來，造成功能基因的缺失或失活.基因敲入(Knock-in):引入不存在的新基因.將外源有功能的基因轉入基因組中不存在或已失活的細胞中與其基因組中同源序列進行同源重組，在細胞內獲得表達，基因替代：基因修正(generepairment)基因打靶的必備條件胚胎幹細胞(ES細胞)能在體外培養，保留發育的全