抗体生产纯化技术进展.pdfVIP

●- _ii 一 、 单抗技术的发展、应用和市场前景 二、治疗用抗体生产技术进展 自1997年FDA批准第一个治疗淋巴癌的嵌合单抗 2．1新型的两步层析技术与整个纯化工艺 药物Rituxan，Anti—CD一20抗体上市，并进人56个国家， MabSelectSuRe的卓越性能以及CaptoAdhere的复 至2007年，FDA已批准了20多种治疗性单抗药物，约 合多除杂功能，使得抗体纯化工艺 由经典的三步层析转 一 半用于治疗癌症 (详见附录 1)，多个已成为年销售额 变为两步层析得 以实现。FDA前验证顾问GailSofer在 超十亿美元的 炸“弹药物”(BlockbusterDrug，图1)。 接受采访时表示，两步层析在验证、内毒素的去除等问 全球抗体药物的市场增长十分迅猛，有约200多种单抗 题上都不会存在障碍。。两步层析的整个工艺该怎样设计 在临床实验 ，占整个临床生物技术药品总数 的三分之一 才能够最大化我们的收率甚至产率，而又保证我们的产 多，其中四分之一在临床三期或等候批准。预计单抗的 品完全合格呢?因此除了两步层析工艺外，还需要在整 全球销售额将从 2004年的5O多亿美金增至 2010年的 个纯化工艺上做文章。 300多亿美元，年均复合增长达到 30％。整个抗体市场 在细胞培养表达以后，采用0．2—0．45um 的中空纤维 (包括多抗)2007年即已经达到210多亿美金 (表 1)。 膜技术进行澄清 (Cellremova1)，然后用MabSelectSuRe 2000年人类基因组序列初稿的完成，近年蛋白质组和结 捕获，酸性条件洗脱后直接pH4．0病毒灭活，澄清过滤 构基因组技术的蓬勃发展，也给抗体研究带来更多机遇 后穿透方式上CaptoAdhere，这一步离子交换之前或之 和挑战。而高细胞密度培养及表达技术、高表达细胞株 后会有一步20nm纳滤去病毒，最后50K膜超滤浓缩和 构建技术以及大规模蛋 白质纯化技术的发展则极大的推 洗滤进行缓冲液置换 。整个工艺如下图2，这一工艺平台 动 了抗体产业化的发展 。 已经尝试过多个不同的抗体 (表2)并取得成功，同时很 多实验表明这一工艺平台适合多数抗体的生产。有些抗 体如果通过优化结果不甚满意，通过增加一步CaptoQ也 基本上可以达到要求或是采用CaptoS—CaptoQ的工 艺步骤 (图 11)。 2．2高密度细胞培养 ：Wave细胞培养技术 Wave细胞培养技术 (图3-4)：治疗用抗体的表达