内毒素耐受对NOD2信号传导通路的影响.docVIP

  内毒素耐受对 NOD2 信号传导通路的影响# 张辉军1，王葆青1，瞿介明2** （1. 复旦大学附属中山医院肺科，上海 200032； 5 10 2. 复旦大学附属华东医院呼吸科，上海 200040） 摘要：目的 研究内毒素耐受对 NOD2、RIP2mRNA 的表达以及对 NF-κB 活化的影响。方 法 建立内毒素耐受 RAW264.7 细胞株细胞模型，real-time PCR 方法检测大剂量 LPS 刺激后 NOD2、RIP2 和 TNF-αmRNA 表达，Western blotting 检测 P65 蛋白表达。 结果 RAW264.7 细胞系细胞经 100ng/ml 的 LPS 预处理 20 小时后表现为内毒素耐受，当再给予大剂量 LPS (1000mg/ml)刺激时 NOD2、RIP2 和 TNF－αmRNA 表达以及 P65 蛋白表达无显著增加。 结论 小剂量 LPS 可能是通过作用于 NOD2 信号传导通路而表现为对后续的大剂量 LPS 无 反应现象（内毒素耐受）。 关键词：免疫学；内毒素耐受；NOD2 中图分类号：R392.1 15 The Effect of Endotoxic Tolerace on NOD2 Proteins Signal Pathway ZHANG Huijun1, WANG Baoqing1, QU Jieming2 (1. Department of Pulmonary Medicine,Zhongshan Hospital,Fudan University, ShangHai 200032; 20 25 30 35 40 2. Department of Pulmonary Medicine,Huadong Hospital,Fudan University, ShangHai 200040) Abstract: OBJECTIVE: In this study we investigated the expression of NOD2、RIP2 and TNF－ αmRNA in RAW264.7 cells with endotoxic tolerance，and the condition of NF-κB were also analyzed. METHODS: The expression of NOD2、RIP2 and TNF－αmRNA in RAW264.7 cell lines with endotoxic tolerance were determined by real-time quantitative PCR. The P65 proteins were quantitatively detected by Western blotting. RESULTS: RAW264.7 cell lines were pretreated with 100ng/ml of LPS for 20 hours presented endotoxin tolerance. And there were no significantly upregulation of NOD2、RIP2 and TNF－αmRNA after stimulation with large dose of LPS(1000mg/ml),as well as the protein levels of P65. CONCLUSION: The NOD2 signal pathway may be the target of the endotoxic tolerace induction. Keywords: immunology; endotoxic tolerance; NOD2 0 引言 内毒素( Endotoxin, ET) 又名脂多糖( Lipopolysaccharide, LPS) , 是革兰氏阴性细菌细胞 壁上的主要成分, 它能激发过度的炎症反应, 是临床上全身炎症反应综合征或感染性休克的 常见原因[1]。内毒素耐受（endotoxin tolerance, ET）是指接受小剂量内毒素刺激后形成的对 后续的大剂量内毒素呈低反应或无反应的现象[2]。这种现象在动物模型和人体中都得到证 实。 先天性免疫是机体抵抗病原微生物入侵的第一道屏障，动物的先天性免疫主要通过模式 识别受体(PRRs)识别病原体相关分子模式(PAMPs)来实现的。PRRs 一直是免疫学研究的热 点，但是到目前为止，关于模式识别受体在内毒素耐受中的作用的研究较少。NOD2 蛋白是 一种胞浆内的模式识别受体，主要参与胞浆内病原微生物的识别[3,4,5,6]。我们推测 NOD2 有 可能参与