RNAi基因抑制对细胞生长和增殖的影响.pptVIP

第五部分 利用RNAi 研究ICF45  细胞内功能 1. 稳定沉默ICF45基因表达的克隆细胞株建立 2． 细胞形态和核变化 观察 3. 细胞生长和增殖能力 4. 细胞周期和DNA含量变化 5． 细胞凋亡率 6． p53表达 7. Centrosome and spindle 8. 微丝形态变化 6.1 稳定沉默ICF45基因表达的 克隆细胞株建立 To construct pAVU6+27/ICF45 plasmid To transfect HeLa cells G418 screening 14days 470 ug/ml To Identify clone by IM and western blotting To Design siRNA against ICF45 稳定RNAi细胞株ICF45基因 表达被有效沉默 Immunofluorecence Cell Shape RNAi Cell Results ICF45基因稳定沉默细胞株细胞形态发生了很大变化，细胞体积变得很大，形态变得极其不规则