第十三章外源基因的表面展示.pptVIP

一、什么是表面展示技术?(What’s surface display technic?) 表面展示技术(surface display technic)是一种将外源肽或蛋白质与噬菌体、细菌或杆状病毒表面特定蛋白质融合表达并展示在其表面的技术，主要用于构建蛋白质或多肽文库，并从中筛选出感兴趣的蛋白质、多肽或抗体等，它在抗体制备、蛋白质相互作用研究、活菌疫苗和生物催化剂研究方面有广泛的应用前景。 二、操作程序(procedure) 随机核苷酸片段 淋巴细胞?总mRNA ?cDNA ?构建重组噬菌体?感染大肠杆菌?筛选(亲和吸附?洗脱?扩增? 继续3-4轮) 三、表面展示系统分类(surface display system taxonomy) 噬菌体表面展示系统 细菌表面展示系统 真核表面展示系统 1. 丝状噬菌体系统 常见的丝状噬菌体有M13、fd、f1等。 M13是大肠杆菌的丝状噬菌体,基因组为6407bp的闭合环状+ssDNA,感染雄性大肠杆菌后,ssDNA转变成dsDNA(复制型),很容易从细胞中分离和基因工程改造及操作. 用于表面展示的基因主要有次要外壳蛋白基因pIII(3-5个/virion)和主要外壳蛋白基因pVIII (3000个/virion). * 马永平 重庆医科大学基础医学院分子生物学