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真空转鼓过滤工艺及操作 1 2 3 4 8 5 9 6 7 １、２ 洗布水阀 ３ 洗涤水阀 ４进料阀 ５排污阀 ６、７ 真空阀 ８ 真空表 9 回流阀 图1-5 真空转鼓过滤机操作示意图 预处理及固液分离技术应用实例 以链霉素发酵液的预处理及固液分离技术为例，其工艺过程如下： 中和 冷却过滤 去提取 过滤或离心 板框过滤或离心分离 酸化滤洗液 酸化液 发酵液 酸化处理 1~2倍量水稀释发酵液 草酸酸化pH2.8~3.2 加热70~750C 产品 第一章 固液分离技术 第一节 发酵液的预处理技术 第二节 固液分离 学习目标 了解发酵液预处理目的及在产品分离纯化过程中的意义； 了解生化产品生产中常用的絮凝剂； 掌握预处理技术的基本原理、方法及基本工艺，能够正确从事发酵液的预处理操作； 掌握固液分离的原理、固液分离方法的选择原理； 掌握传统固液分离技术基本工艺及操作，能够正确从事固液分离操作；能够正确分析影响固液分离的有关因素,并能对分离过程中有关问题进行正确处理。 第一节 发酵液的预处理技术 预处理的意义 发酵液是一种混合物，含有的固体颗粒和杂质对进一步的提取分离或产品质量构成危害。如离子交换中影响交换的选择性、交换能力等，萃取过程中易乳化等。 预处理的目的 改变发酵液的物理性质(黏度、颗粒稳定性等)加快悬浮液中固形物沉降的速度 除去大部分可溶性杂质 目标产物转移至便于后处理的一相(多数为液相)； 总之，对发酵液进行预处理利于固液分离及后提取工序顺利进行。 如何选择适当的方法进行预处理？ 选择预处理方法需依据： 了解生物活性物质存在的部位 稳定性 后续提取工艺对料液质量的要求 可溶性杂质 可 溶 性 杂 质 来 源 蛋白质/多肽 细胞中各种结构功能蛋白、酶类等，多数可以通过沉淀、吸附、色谱、超滤及超速离心等方法去除 脂类/脂蛋白质 细胞膜磷脂分子、脂蛋白等具有亲水性，当提取液中存在有机溶剂时，或发酵培养时所添加的油性消泡剂也可溶解于提取液中。用萃取法去除 多酚类 多为植物组织或细胞来源的色素类物质，发酵产物粗制提取液中亦存在，一般用沉淀或色谱法去除 核酸类 细胞裂解过程释放，使黏度增大，可用离子交换色谱、硫酸鱼精蛋白沉淀或加核酸酶消化等方法除去 内毒素 脂多糖物质，多来自革兰阴性菌的细胞壁，可用超滤、吸附、离子交换色谱和亲和色谱的方法去除 牛血清 细胞培养液中加入的牛血清成分 小分子类物质 糖类以及工艺处理溶液中所含有的小分子组分，可采用透析、色谱和超滤等手段去除 盐类 含Ca2＋、Mg2＋、Fe2＋的盐，加酸或碱去除 预处理的原理及方法 1.降低液体黏度 降低液体黏度可提高过滤速率。怎样降低？ （1）加水稀释法 :可有效降低液体粘度,但增加悬浮液的体积，使后处理任务加大。 （2）升高温度:①让发酵液通过螺旋板、列管等换热器，用热介质进行加热；②如果目标物质受温度变化影响较小，发酵液又需适当稀释时，可在发酵液内直接通入蒸汽或热水进行加热。 3.酶解法 酶解法可将混合液中的不溶性多糖物质酶解，使其转化为溶解度较大的单糖，从而改变流体的流动特性，提高过滤速率 。 2.调整pH值 调pH至等电点使两性物质沉淀。在膜分离中，调整pH，改变易吸附分子的电荷性质，以减少吸附造成的堵塞和污染。 pH值的调节一般是在发酵液中加入一定浓度的酸（碱）溶液，如果需要也可加入一定量的酸（碱）缓冲溶液。 （1）凝聚作用（coagulation） 凝聚作用是指在某些电解质（凝聚剂）作用下，使胶粒之间双电层的排斥作用降低，电位下降，吸引作用加强，破坏胶体系统的分散状态，而使胶体粒子聚集的过程。 胶体粒子保持分散状态的原因： 常用的凝聚剂：AlCl3·6H2O、Al2(SO4)3·18H2O、K2SO4·Al2(SO4)3·24H2O、FeSO4·7H2O、FeCl3·6H2O、ZnSO4和MgCO3等。 影响凝聚作用的主要因素是：无机盐的种类、化合价及无机盐用量等。 4.凝聚与絮凝 （2）絮凝作用（flocculation） 絮凝作用是利用带有多种官能团的高分子线状化合物能在分子上吸附多个微粒的能力，通过架桥作用将许多微粒聚集在一起，形成粗大的松散絮团的过程。所利用的高分子化合物称为絮凝剂。根据絮凝剂所带电性的不同，分阴离子型、阳离子型和非离子型三类。 排斥电位和产生吸附架桥作用的双重机制是絮凝的主要原因。 带有负电性的微粒，加入阳离子型絮凝剂，具有