生物化学（工科）代谢的调节控制.pptVIP

3 ．可阻遏操纵子― 合成代谢基因表达的调节 可阻遏操纵子（repressible operon ）通常情况下是开放的，即阻遏蛋白处于失活状态，不能同操纵基因结合。当合成代谢的终产物积累，它作为辅阻遏物（或称共阻遏物）与阻遏蛋白结合，并使其发生构象改变，变构后的阻遏蛋白与操纵基因的亲和力增强，于是同操纵基因结合，将操纵子关闭。这便是合成代谢的终产物反馈阻遏机制。色氨酸操纵子（trp operon ）是色氨酸合成的调节功能单位。芳香族氨基酸的合成是一个分支代谢途径，从原料4 一磷酸赤鲜糖和磷酸烯醇式丙酮酸开始到生成分支酸（chorismate ）是共同途径，从分支酸之后分成3 个途径分别合成苯丙氨酸、酪氨酸和色氨酸。从分支酸到色氨酸有5 步反应，由5 个酶催化。色氨酸操纵子含有5 个结构基因，分别编码这5 个酶。控制色氨酸操纵子的调节基因（trpR ）与色氨酸操纵子并不连锁，相隔较远（图13-7 ）。 图13-7 色氨酸操纵子 第四节代谢调控在工业上的实践意义 一、酶活性调节在工业上的应用 二、酶合成调节在工业上的应用  一、酶活性调节在工业上的应用 1 ．降低终产物浓度― 解除反馈抑制 2 ．利用抗代谢产物类似物― 关键酶的脱敏作用 3 ．增大细胞膜通透性― 使代谢产物易于转运到胞外 4 ．控制发酵条件― 使产品定向生成 1 ．降低终产物浓度― 解除反馈抑制 ( 1 )鸟氨酸发酵鸟氨酸是精氨酸合成途径的中间产物。在正常的合成过程中，谷氨酸经5 步反应生成鸟氨酸，鸟氨酸（ornithine）再由鸟氨酸转氨甲酰酶( ornithine tranocar - bamylase )催化生成瓜氨酸(citrulline ) ，再经过一系列反应最后生成精氨酸。在这个途径中终产物精氨酸对关键酶N-乙酰谷氨酸激酶(N-acetylglutamate kinase ) （又称N-乙酰谷氨酸一5 一磷酸转移酶N-acetylglutamate – 5-phosphotransferase ）有反馈抑制作用（图13-8 ) ，因此鸟氨酸不可能大量积累。但利用人工诱变筛选出的谷氨酸棒杆菌（Corynebacterium glutamicum ）瓜氨酸营养缺陷型菌株，由于该菌株鸟氨酸转氨甲酞酶缺失，所以不能合成瓜氨酸，也就没有终产物精氨酸的积累，解除了它的反馈。只要供给少量的瓜氨酸或精氨酸以保证细菌生长，就能不断积累鸟氨酸。 ( 2 )肌苷酸发酵肌苷酸（inosine monophosphate , IMP ）是嘌呤核苷酸合成的中间产物，在正常情况下，由于这个分支代谢的终产物AMP 和GMP 对此合成途径中的第一个酶PRPP 酰胺转移酶（5 –phosphoribosyl-1-pyrophosphate transamidase ）和分支点后的第一个酶AMPS 合成酶（adenylsuccinate synthetase ）及IMP 脱氢酶（inosine phosphate dehydrogenase ）有反馈抑制和反馈阻遏作用(图13-9 ) ，所以不会有肌苷酸的积累。 图13 一9 嘌呤核苷酸合成的调节 ( 3 )赖氨酸发酵天冬氨酸合成苏氨酸、甲硫氨酸和赖氨酸的途径中，3 种终产物氨基酸对第一个酶天冬氨酸激酶（aspartic acid kinase , AK ）具有反馈抑制及反馈阻遏作用（图13-10 ）。赖氨酸生产中采用谷氨酸棒杆菌的高丝氨酸缺陷型。这个菌株的高丝氨酸脱氢酶失活，不能合成高丝氨酸，因而苏氨酸和甲硫氨酸的量很少，解除了它们对关键酶AK 的反馈抑制和阻遏作用，从而有利于另一个终产物赖氨酸的积累。只要给予亚适量的苏氨酸、甲硫氨酸或高丝氨酸，使这种突变型菌株能止常生长就可以积累大量的赖氨酸。 图13-10 赖氨酸、苏氨酸及甲硫氨酸合成的调节 2 ．利用抗代谢产物类似物― 关键酶的脱敏作用 所谓代谢产物类似物是指其结构与代谢产物结构类似的化合物。如嘌呤的类似物有6-巯基嘌呤、2 , 6-二氨基嘌呤、6-氯化嘌呤等。嘧啶的类似物如5-嗅尿嘧啶、5 -氟尿嘧啶等。这些代谢产物类似物在合成过程中往往起反馈抑制作用。用人工诱变的力法可以获得对这些抑制物（代谢产物类似物）有抵抗力的菌株（即抗代谢产物类似物变异株）。这此突变株的酶降低了对产物抑制和阻遏的敏感性，但仍具有催化特性（即发生了脱敏作用），这就避免了终产物的反馈抑制（或阻遏）。这种营养缺陷与改变调节酶（关键酶）性质相结合的方法，比单纯使用营养缺陷型更有效。因为改变调节酶的性质使其脱敏，只需找到它的反馈物（代谢产物）的类似结构物即可专一地改变调节酶，从而解除欲积累的代谢物对此调节酶的反馈抑制（或阻遏）作用。 3 ．增大细胞膜通透性― 使代谢产物易于转运到胞