生物工业分析.ppt

气相色谱分析 　　（2）固定液的分离特征。 　　在气相色谱中常用“极性”来说明固定液和被测组分的性质。由电负性不同的原子所构成的分子，它的正电中心和负电中心不重合时，就形成具有正负极的极性分子。如果组分与固定液分子性质（极性）相似，固定液和被测组分两种分子间的作用力就强，被测组分在固定液中的溶解度就大，分配系数就大，也就是说，被测组分在固定液中溶解度或分配系数的大小与被测组分和固定液两种分子之间相互作用力的大小有关。 分子间的相互作用力包括静电力、诱导力、色散力和氢键力等。 气相色谱分析 　　（3）固定液的选择 　　a．分离非极性物质，一般选用非极性固定液，这时试样中各组分按沸点次序先后流出色谱柱，沸点低的先出峰，沸点高的后出峰。 b．分离极性物质，选用极性固定液，这时试样中各组分主要按极性顺序分离，极性小的先流出色谱柱，极性大的后流出色谱柱。 c．分离非极性和极性混合物时，一般选用极性固定液，这时非极性组分先出峰，极性组分（或易被极化的组分）后出峰。 d．对于能形成氢键的试样一般选择极性的或是氢键型的固定液，不易形成氨键的先流出，最易形成氨键的最后流出。 气相色谱分析 　　（4）进样时间和进样量 进样速度必须很快，一般用注射器或进样阀进样时，进样时间都在一秒钟以内。 　　液体试样一般进样0.1～5μL。气体试样0.1～10 mL。最大允许的进样量，应控制在峰面积或峰高与进样量呈线性关系的范围内。 　　（5）气化温度 　　进样后要有足够的气化温度，使液体试样迅速气化后被载气带人柱中。在保证试样不分解的情况下，适当提高气化温度对分离及定量有利。一般选择气化温度比柱温高30～70℃。 气相色谱分析 　二、操作步骤 　　启动仪器前先检查气路，电路是否按照要求接好，通入载气，先开钢瓶阀，再开减压器，调节针形阀，控制载气流速度使之符合操作条件。 　　启动、恒温，开启总电源开关，再依次打开柱槽、进样器、热导温控开关，将柱温、汽化室、检测器温度调节旋钮转至要求的位置，加热至一定时间后，用温度测量旋钮分别检查三处温度是否符合要求，若温度已符合要求，再检查载气流速是否正常。 气相色谱分析 　　调整基线衰减到要求值，打开热导开关，将桥电流调节旋钮旋到电流要求值，同时打开数据处理系统，击“查看基线”，再击“基线调零”。此时，基线回到“0”位置，仪器稳定后，基线应在“0”位置，若不在，击“基线调零”，选择适当的时间值电压值和分析方法及其他选项，待基线走直后，即可进行分析。 　　进样，用微量进样器注入待测样品。 　　关机，测量完成后，将桥电流调节旋钮转到最小位置，关闭热导电源，柱槽，进样器，热导温控开关，再关掉总电源，待温度下降后，关断载气。 生物工业分析 第七章　气相色谱分析 第一节　基本原理 第二节　气相色谱操作 第三节　色谱分析 第四节　应用实例（酒中醇酯类组分的分析） 气相色谱分析 第一节　基本原理 　　一、气相色谱法概述 　　它的分离原理是，使混合物中各组分在两相间进行分配，其中一相是不动的，称为固定相，另一相是携带混合物流过此固定相的流体，称为流动相。当流动相中所含混合物经过固定相时，就会与固定相发生作用。 由于各组分在性质和结构上的差异，与固定相发生作用的大小、强弱也有差异，因此在同一推动力作用下，不同组分在固定相中的滞留时间有长有短，从而按先后不同的次序从固定相中流出。这种借在两相间分配原理而使混合物中各组分分离的技术，称为色谱分离技术或色谱法（又称色层法、层析法）。 气相色谱分析 　　色谱法分类： 　　（1）按流动相的物态，色谱法可分为气相色谱法（流动相为气体）和液相色谱法（流动相为液体）；再按固定相的物态，又可分为气固色谱法（固定相为固体吸附剂）汽液色谱法（固定相为涂在固体担体上或毛细管壁上的液体）、液固色谱法和液液色谱法等。 （2）按固定相使用的形式，可分为柱色谱法（固定相装在色谱柱中）、纸色谱法（滤纸为固定相）和薄层色谱法（将吸附剂粉末制成薄层作固定相）等。 　　（3）按分离过程的机制，可分为吸附色谱法（利用吸附剂表面对不同组分的物理吸附性能的差异进行分离）、分配色谱法（利用不同组分在两相中有不同的分配系数来进行分离）、离子交换色谱法（利用离子交换原理）和排阻色谱法（利用多孔性物质对不同大小分子的排阻作用）等。 气相色谱分析 　　1．气相色谱的一般流程 　　如图7－1所示。载气由高压钢瓶1供给，经减压阀2减压后，进入载气净化干燥管3以除去载气中的水分。由针形阀4控制载气的压力和流量。流量计5和压力表6用以指示载气的柱前流量和压力。再经过进样器（包括气化室）7，试样就在进样器注人（如为液体试样，经气化室瞬间气化为气体）。由不断流动的