实验2-2酵母菌的形态观察及死活细胞的鉴别.pdfVIP

实验2-2 酵母菌的形态观察及 死活细胞的鉴别 酵母菌的形态观察及死活细胞的鉴别 目的要求 观察酵母菌的形态及出芽生殖方式，学习区分酵 母菌死活细胞的实验方法。 掌握酵母菌的一般形态特征及其与细菌的区别。 酵母菌的形态观察及死活细胞的鉴别 基本原理 酵母菌的形态观察及死活细胞的鉴别 酵母菌是不运动的单细胞真核生物,其大小通常比 常见细菌大几倍甚至十几倍。大多数酵母以出芽方式 进行无性繁殖,有的分裂繁殖；有性繁殖是通过接合产 生子囊孢子。本实验通过美蓝染液水浸片来观察酵母 的形态和出芽生殖方式。 美蓝是一种无毒性的染料,它的氧化型呈蓝色,还 原型无色。用美蓝对酵母的活细胞进行染色时, 由于细 胞的新陈代谢作用,细胞内具有较强的还原能力,能使美 蓝由蓝色的氧化型变为无色的还原型。因此,具有还原 能力的酵母活细胞是无色的、而死细胞或新陈代谢作 用微弱的衰老细胞则呈蓝色或淡蓝色,借此即可对酵母 菌的死细胞和活细胞进行鉴别。 酵母菌的形态观察及死活细胞的鉴别 器材 1、菌种 培养约2d的酿酒酵母培养物 2、溶液或试剂 0.1 ％吕氏碱性美蓝染色液 3、仪器或其他用具 显微镜，载玻片，盖玻片等 酵母菌的形态观察及死活细胞的鉴别 操作步骤 酵母菌的形态观察及死活细胞的鉴别 1.在载玻片中央加一滴0.1％ 1.在载玻片中央加一滴0.1％ 吕氏碱性美蓝染色液，然后 吕氏碱性美蓝染色液，然后 按无菌操作用接种环挑取少 按无菌操作用接种环挑取少 量酵母菌苔放在染液中，混 量酵母菌苔放在染液中，混 合均匀。 合均匀。 染液不宜过多或过少，否 则，在盖上盖玻片时，菌液会溢出或 出现大量气泡而影响观察。 酵母菌的形态观察及死活细胞的鉴别 2、用镊子取一块盖玻片，先 2、用镊子取一块盖玻片，先 将一边与菌液接触，然后 将一边与菌液接触，然后 慢慢将盖玻片放下使其盖 慢慢将盖玻片放下使其盖 在菌液上。 在菌液上。 盖玻片不宜平着放下， 以免产生气泡影响观察 酵母菌的形态观察及死活细胞的鉴别 3、将制片放置约3min后 镜检，先用低倍镜后用 高倍镜观察酵母的形态 和出芽情况，并根据颜 色来区别死活细胞。 4、染色约0.5h后再次进 行观察，注意死细胞数 量是否增加。 酵母菌的形态观察及死活细胞的鉴别 酵母菌的形态观察及死活细胞的鉴别 实验结果 1、结果 绘图说明你所观察到的酵母菌的形态特征。 2、思考题 1、吕氏碱性美蓝染液浓度和作用时间的不同，对酵 母菌死细胞数量有何影响？试分析其原因。 2、在显微镜下，酵母菌有哪些突出的特征区别于一 般细菌？