染色质免疫沉淀技术在研究DNA与蛋白质相互作用中的应用.pdfVIP

染色质免疫沉淀技术在研究DNA与蛋白质相互作用中的应用.pdf

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维普资讯 遗 传 HEREDITAS(Beijing)27(5):801~807,2005 技 术 与 方 法 染色质免疫沉淀技术在研究 DNA与蛋 白质 相互作用中的应用 王春雨 ,石建党 ,朱 彦 ,张 琚 (1.南开大学分子生物学研究所 ,教育部生物活性材料重点实验室 ,天津 300071; 2 美国塔 芙茨大学 医学院 ,圣伊丽莎 白医学 中心心血管研究所分子生理学实验室 ,波士顿 ,马萨诸塞 02135—2997,美 国) 摘 要 :在后基 因组时代 ,DNA.蛋 白质的相互作用是研究基 因表达调控 的一个重要领域。与其他方法相 比,染色质 免疫沉淀技术 (chromatinimmunoprec tationassay,CHIP)是一种在体 内研 究 DNA-蛋 白质相互作用 的理想 的方法。 近年来这种方法与 DNA芯片和分子克隆技术相结合 ,可用于高通量 的筛选 已知蛋 白因子 的未知 DNA靶点和研究 反式作用因子在整个基因组上的分布情况 ,这将有助于深入理解 DNA-蛋 白质相互作用 的调控 网络。总结 了染色 质免疫沉淀技术的方法 ,特别介绍 了使用这些方法取得 的最新进展 。 关键词 :DNA-蛋白质相互作用 ;染色质免疫沉淀技术 (CHIP);DNA芯片 ;ChlP-克 隆 中图分类号 :Q78 文献标识码 :A 文章编号 :0253—9772(2005)05—0801—07 ApplicationofChromatin ImmunoprecipitationAssay in DeCiphering DNA.Protein InteraCtjonS WANG Chun.Yu。,SHlJian—Dang。,ZHU Y8.13。~,ZHANG Ju0 (1 TheKeyLaboratoryofBioactiveMaterials,MinistryofEducetion,InstituteforM olecularBiology,NankaiUniversity, Tianjin300071,China:2 LaboratoryofMolecularPhysiology,DivisionofCerdiovascularResearch,St Elizabeth’S Medico/Center,TuftsUniversitySchoolofMedicine,Boston,MA 02135—2997.USA) Abstract:Inthepost-genomicera,identifyingandcharacterizingvariousDNA-proteininteractionsareamajorchal- lenge intheresearchofgenetranscriDtiOnaIregulation.Althoughmanytechniquescanbeusedforthispurpose,chro- matin immunoprecipitationassay (ChIP),bycontrast,isideallysuitedforstudyingDNA-proteininteractions 门『vivo In recentyears,standardChIPassayhasbeenmodifiedtouncoversomeknownfactors’unknowntargetsequences,es- peciallywhen combinedwithDNA microarrayandmolecularcloningstrategies.These

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