结核分枝杆菌转录因子Rv2745c调控RelMtb功能的研究.docVIP

  结核分枝杆菌转录因子 Rv2745c 调控 RelMtb 功能的研究# 薛超伦，张华** 5 10 15 20 25 30 35 40 （华中农业大学生命科学技术学院） 摘要：研究结核分枝杆菌转录调控因子 Rv2745c 与 RelMtb 在物理上的相互作用，及 Rv2745c 对 RelMtb 的功能调控作用。方法：细菌双杂交方法检测 Rv2745c 与 RelMtb 的相互作用， 并采用薄层层析的方法研究 Rv2745c 对 RelMtb 合成活性的影响。结果：细菌双杂交结果显 示转录调控因子 Rv2745c 与 RelMtb 存在较强的物理相互作用；薄层层析结果显示纯化的 RelMtb 蛋白具有很好的体外合成(p)ppGpp 的能力，并且 Rv2745c 能促进其合成活性。结论： 通过以上研究发现 Rv2745c 与 RelMtb 存在较强的物理和功能上的相互作用，为探索 RelMtb 的新型调控机制奠定了基础。。 关键词：微生物；结核分枝杆菌；RelMtb；Rv2745c；(p)ppGpp 中图分类号：Q93 Study on transcription factor Rv2745c regulating RelMtb function in Mycobacterium tuberculosis Xue Chaolun, Zhang Hua (College of life science and technology, Huazhong Agricultural University) Abstract: In this paper, the aim is to investigate the physical and functional interaction between Rv2745c and RelMtb in Mycobacterium tuberculosis. Methods: Bacterial Two-Hybrid system was used to the study on the physical interaction between Rv2745c and RelMtb. Thin-layer chromatography was applied to detect the (p)ppGpp synthesis activity of RelMtb affected by Rv2745c. Results: The results of Bacterial Two-Hybrid system showed the stronger physical interaction between Rv2745c and RelMtb. Thin-layer chromatography demonstrated that significantly increasing of (p)ppGpp synthesis activity of RelMtb affected by Rv2745c. Conclusion: The physical and functional interaction between Rv2745c and RelMtb lay a foundation for a new regulation mechanism of RelMtb. Key words: Microbiology; Mycobacterium tuberculosis; RelMtb; Rv2745c; (p)ppGpp 0 引言 鸟苷四磷酸/鸟苷五磷酸（(p)ppGpp）是细菌在面临如氨基酸饥饿等胁迫环境时产生的 小分子效应物，能够响应如异亮氨酸等氨基酸饥饿及各种外界环境变化，并与包括 sigma 因 子在内的许多蛋白质相互作用，调节一系列的生理活动，帮助细菌抵御不良环境[1, 2]。 细菌体内 (p)ppGpp 的代谢是由 rsh 基因（rel 同源基因）编码的 RSH 蛋白（Rel/Spo 同 源酶）完成。目前研究较为清楚的 RSH 酶是大肠杆菌（Escherichia coli）中的 RelA 和 SpoT 蛋白。RelA 只具有(p)ppGpp 的合成活性，而 SpoT 则兼有合成和水解活性，并且以水解活 性为主[3]。结核分枝杆菌仅含有一个(p)ppGpp 代谢相关基因，即 RelMtb。RelMtb 兼有(p)ppGpp 合成和水解活性。目前研究发现 Mg2+浓度的变化可以调控 RelMtb 活性功能[4]，其它调控方式 未见报道。 基金项目：教育部高等学校博士学科点专项科研基金（20100146120022） 作者简介：薛超伦（1986-），女，硕士研究生，病原微生物