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中草药 ChineseTraditionalandHerbalDrugs 第36卷第4期2005年4月 ·537 ·
各因素对醇沉效果的影响程度依次为A(乙醇体积 表8 Savage法与TCA工艺参数比较
分数)B(药液浓缩程度)C(pH值),A因素影响 Table8 ComparisonofSavage
差异有高度显著性,B因素影响差异有显著性,直观 andTCAmethodparameter
分析表明多糖的质量分数最高的工艺为A,B,C3,即 参 数 Savage法 TCA法
蛋白去除率/% 89.47 97.25
醇沉时乙醇体积分数为800o,药液浓缩至 1mL药
多糖损失率/% 37.62 12.87
液/g生药,药液pH值为40 色素去除 无明显减少 随蛋白去除而大量去除
2.6 验证试验:据筛选所得最佳提取工艺 溶剂用量 正丁醇、氯仿消耗量大 少量三氯乙酸水溶液
A,B,C,D:和最佳醇沉工艺A,B,C3,进行正交验证试 3.2 桑叶多糖的水提取和醇沉分离是不同的工艺
验,得桑叶多糖质量分数为4.05mg/g生药((n=3)o 过程,故对水提取和醇沉分离分别采用正交试验来
2.7 不同蛋白去除法对多糖提取的影响:醇沉时与 获得最佳水提取工艺和醇沉分离工艺是有必要的。
多糖一起沉淀下来的蛋白质对多糖测定值及纯度产 经过验证,优选的桑叶多糖提取分离工艺稳定可行。
生很大的影响,一般采用Savage法除去蛋白质,蛋 3.3 水提醇沉是多糖提取中较常用的方法,本实验
白质总去除率可达 89.47写,但同时多糖损失达 优化了水提取工艺和醇沉分离。目前一些新技术、新
37.62%(表8),且有大量不溶于水的颗粒沉淀物产 方法如超声提取技术、微波萃取技术、酶法等也用于
生和粗多糖颜色较深,不利于粗多糖的进一步纯化。 多糖的提取分离中,因此有必要采取这些新技术、新
采用三氯乙酸(TCA)法代替Savage法,一次去除 方法提取桑叶多糖并与传统方法相比较。
蛋白质后,上清液中蛋白质就降至Savage法5次除 References:
蛋白的结果,此时多糖的损失率仅为12-87%0。实验 [1]ChenFJ,LuJ,ZhangYY.Pharmacologicalstudieson
中还发现,采用TCA法处理后溶液中的色素随着 Morus(I):EffectoftotalpolysaccharideofMorus(TPM)
oncarbohydratemetabolismindiabeticmice[J].JShenyang
蛋白质的沉淀而部分除去。可见用TCA法去除蛋
PharmUniv(沈阳药科大学学报),1996,13(1):24-27.
白质的效果优于传统的Savage法。 [幻 HosseinzadehH,SadeghiA.Antihyperglycemiceffectsof
3 讨论 MorusnigraandMorusalbainmice[J].PharmPharmacol
3.1 桑叶多糖的提取中,原料的预处理用80%乙 Lett,1999,9(2):63-65.
仁3] OuYZ,LiYH,SuSL,etal.Determinationofpolysa-
醇回流,目的是为了除去桑叶中单糖、双糖、低聚糖、
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