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维普资讯
中国奶牛 ·2O08年第 5期 · 7 ·
奶牛Y精子膜蛋 白的提取与分析
李彦臻，杨利国
(华中农业大学动物科技学院，武汉 430070)
中图分类号 ：$823．3+4 文献标识码 ：A 文章编号 ：1004—4264(2o08)05一o007—04
摘要 ：奶牛Y精子膜蛋白的提取与鉴定为深入研究Y精子特异膜蛋 白在受精过程中的作用，开发经济、安全、高效
的奶牛性别控制方法具有重要意义。本研究采用超声波破碎法将精子膜与精子分离，分离后 的精子膜粗品采用蔗
糖密度梯度离心法进行纯化。纯化的精子膜经膜蛋白提取液(去污剂)提取 ，透析浓缩。经变性聚丙烯酰胺凝胶电泳
(SDS—PAGE)~$盐染色。成功地提取到膜蛋白。BIO—RAD凝胶成像分析仪分析得知Y精子膜蛋 白至少有 10种 ，分
子量范围为7．94KD 166．65KD．其中尤以 15KD的蛋 白含量最多。
关键词 ：奶牛：性别控制；Y精子；膜蛋白；SDS—PAGE分析
ExtractionandAnalysisoftheY sperm MembraneProteinsinDairyCattle
LiYanzhen，Yangliguo
(CollegeofAnimalScienceandTechnology，HuazhongAgriculturalUniversity，Wuhan 4300709)
Abstract：nlepresentstudyaimedtoextractandanalyzeYspermmembrnaeproteinsbySDSindairycattle,whichphysabasicnad
criticalroleinseparatingnadpurifyingthespecificmemb raneproteinsofYsperm．nlememb raneWasseparatedfromspemr by ultrasonicand
DurifiedwiththemehtodofsucrosedensitygradientscentrifugatiorrI1lespemr memb raneproteinswereextractedfromthepurifiedmembraneby
hteuseofsolutionforexrtactingmembraneprotein(decontaminant)。htendialyzednadconcenrtated．Thesilver-stainedprofilesofSDS
showedthattIlespecificmetIlodCna extractmemb raneproteinssuccessfullyandthereareatleast10differentkindsofproteins,rangingfrom
7．94KDot166．65KDinmo~culraweight,predominnatlyin15KD,by BIO-RADanalysis．nleresultishelpfulforfurtherstudyaboutspecfiic
functionsofYspemr memb raneproteinsinorderot developamoreeconomical,safer,nadmoreeffectivemetIlodofsexcontrolindairycattle．
Keywords：Dairycattle；Sexcontrol；Yspemr ；Memb raneproteins；SDSnaalysis
精子膜表面存在多种糖蛋 白或多糖复合物 。与精卵 1 材料与方法
识别、结合 以及质膜融合等受精活动密切相关；此外 ， 1．1 试验材料
作为精子抗原．在免疫避孕和免疫不育的治疗及动物的
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