ILF3蛋白对雌激素受体beta的调控研究.pdfVIP

浙江理工大学学报，第30卷，第6期，2013年11月 of Joumal Sci—Tech Zhejiang University V01．30，No．6，Nov．2013 文章编号：1673—3851(2013)06—0887—04 I LF3蛋白对雌激素受体beta的调控研究 黄云仙，张风群，贾军祥。丁明，赵辅昆 (浙江理工大学生命科学学院，杭州310018) 摘要：雌激素在体内的生理作用通过雌激素受体(Estrogen 在乳腺癌、前列腺癌、结肠癌和卵巢癌的发生、发展过程中具有调控作用。ILF3是RNA结合蛋白中的一员，参与细 H水NA 胞周期调控。凝胶阻滞实验(EMSA)证明了ILF3蛋白能结合ERG3’UTR。雌激素受体可介导雌激素实现 其功能，ILF3蛋白可能通过与ER8结合参与雌激素信号通路的调控。为探讨他们的关系以及调控机制，构建1LF3 过表达的慢病毒载体，通过westem blot检测ER口蛋白的表达情况。在蛋白水平上，ERp蛋白的表达量随着ILF3 蛋白量的升高而升高，‘ILF3对ER口起正向调控。MTT实验检测ILF3基因表达对MCF-7细胞活力有影响。 关键词：ILF3；ERB；调控表达；MTT 中图分类号：Q291 文献标志码：A 即白介素增强结合因子3，是双链RNA结合蛋白， 0 引 言 位于人类19号染色体上。ILF3蛋白存在于细胞核 雌激素广泛存在于生殖道、乳腺、中枢神经和骨 和细胞质中，ILF3序列中有一个核定位信号，两个 骼系统等组织中，在生长、发育和分化中起着重要的 作用[1]。雌激素在体内的生理作用的调控通过雌激 链RNA结合结构域是作为核输出结构域[9]。 素受体(EstrogenReceptor，ER)的介导来实现。 Shift 雌激素受体属于核受体家族，在细胞质和细胞核内 phoreticMobility 都有分布，其具有2种亚型：ERa与ERG。ERa主 要存在于子宫内膜、乳腺、卵巢和下丘脑，ER8主要 过表达的慢病毒载体，在乳腺癌细胞MCF-7中研究 其对E即蛋白表达量的影响，并通过MTT实验检 存在肾、脑、骨骼、前列腺和内皮细胞[2]。ERa与 ERp具有高度的序列同源性和相似的结合结构域， 但ERa与E即在功能上有时表现出相反的调控活揭示ILF3的功能提供了理论依据，为更深入的研 究雌激素信号途径提供实验基础。 性[3]。研究表明ERa能刺激细胞分裂和增殖，E即 能拮抗ERn的表达，抑制细胞增殖，E即可能是肿 1材料和方法 瘤抑制基因[4]。雌激素在前列腺细胞的生长和前列 腺癌的发生中都起着重要的作用[5]。研究发现在敲 1．1材料和试剂 pLJMl一EGFP来自Dr．David 除ERl3(pERKO)的小鼠身上出现了前列腺增生老 MCF_7细胞由本实验室保存；大肠杆菌菌株E．∞zi 化现象[6]。在ERB敲除的小鼠的结肠细胞中，正在 增殖的细胞数升高，上皮细胞分化的标志蛋白 减少‘7|。 EnhancerFactor3) ILF3(InterleukinBinding 收稿日期：2012—12—27 作者简介：黄云仙(1987一)，女，浙江建德人，硕士研究生，主要从事肿瘤蛋白质组学研究。 通信作者：丁 明，E-mail：rnjngd