马铃薯脱毒试管苗接种污染原由及防除技巧.pdfVIP

维普资讯 内蒙古农业科技2oo5(7)：21 InnerMongoliaAgriculturalScienceAndTechnology 马铃薯脱毒试管苗接种污染原因及防除技巧 杨 萍。 张 涛 (西吉县马铃薯生产研究所，宁夏 西吉 756200) 中圈分类号：$532 文献标识码：B 文章埔号：1007—09o7(2o05)07—0021一O1 1 感染原因 食用水。以减少菌源和避免杂菌滋生蔓延。 在马铃薯脱毒试管苗切段扩繁过程中，常常 2．1．2 洗瓶及培养基灌装干净、封 口及时 灌装 有部分接种苗瓶被感染，其原因主要有3个方面： 培养基的瓶子必须清洗干净。最后一道工序最好 1．1 苗源及苗源瓶带菌 用蒸馏水涮一遍。瓶湿时水珠分布均匀，瓶干时 苗源瓶 中的苗源已感染了杂菌。但由于是初 透明感强；培养基灌装必须干净利索，瓶El及瓶壁 期感染，菌源太小，肉眼不易发现，接种到培养基 不要黏结培养基，而且封I=I要严密及时。 瓶中引起多瓶感菌；苗源瓶表面消毒不彻底，常常 2．1．3 湿热灭菌 这是马铃薯脱毒苗工厂化生产 黏结真菌、细菌、霉菌及一些杂菌。在接种过程中 工艺流程中至关重要的环节。也是对器械、器皿 带入接种瓶引起感染。 和未接种培养基彻底消除污染菌源最关键、最有 1．2 培养基带茵 效的一项措施。最关键的几个数字指标是：需灭 经过湿热灭菌的培养基内有些还存在未杀死 菌的器械、器皿或培养基按操作规程装入高压灭 的耐高温的杂菌或者培养基高压灭菌不彻底 (时 菌锅内灭菌，待锅内压力升到0．5kg，cm2，时打开排 间短、压力不够等)，绝大部分杂菌未杀死，而且经 气阀，彻底排完冷空气，再关闭排气阀使压力稳定 高压消毒的培养基不缓放3～4d。随高压消毒随接 在 1．1kg／em0，温度为 120～121℃下 2O～25rain，灭 种，没有菌源快速繁殖的空间，所以，就容易用带 菌时间不宜超过 30rain。以免引起培养基成分变 菌的培养基接种，造成人为感染。 化。 1．3 操作环节及气流带茵 2．2 熟练掌握接种技巧 l-3．1 接触传染 在接种时，工作人员的身体和 2．2．1接种室 (无菌室)杀灭菌源 在每次接种 操作器械带菌。如工作人员双手不经过细心消毒。 前 ，用紫外线灯光照射 ，杀菌30～35rain，每隔4— 镊子、剪刀消毒不彻底，在培养基接种的同时，也 5d用甲醛与高锰酸钾按 lm33：1的比例熏蒸 lO～ 将杂菌接于培养基上。 12h，杀死空气中的污染菌源。同时结合75％酒精 1．3．2 气流传菌 包括接种室(无菌室)和组培室 作降尘处理(喷雾)。 内空气的杂菌。如工作人员接种时大声说话、取 2．2．2 苗源瓶(基础苗)进行瓶外彻底消毒 据笔 物不轻拿轻放等，而引起脱毒苗及培养基再度被 者多年切段扩繁(接种)经验所知，工作人员常常 污染。 会忽略从组培室 (培养室)拿取的基础苗是带菌 2 防除技巧 者，因此，对瓶外消毒往往是流于形式或不消毒 ， 在马铃薯脱毒试管苗切段扩繁 (接种)过程 最终造成一瓶带菌的基础苗引发大数量的接种组 中，减少污染苗的关键技巧是：接种前消灭污染菌 培苗的污染。另外，杜绝用感染苗接种。 源、接种环节熟练掌握、接种后控制杂菌传播。 2．2．3 选择无污染培养基 把经过高温、高压灭 2．1 接种前消灭污染茵源