一株对蚊子幼虫高效的Bt新菌株的特性研究.pdfVIP

第 34卷第 5期 河 北 农 业 大 学 学 报 Vo1．34No．5 2011年 9月 JOURNALOFAGRICULTURALUNIVERSITYOFHEBEI Sep ．2011 文章编号 ：1000—1573(2011)O5—0069—04 一 株对蚊子幼虫高效的Bt新菌株的特性研究 郭丽伟 ， 苏俊平 ， 宋 萍 ， 张冬冬 ， 王勤英 (1．河北农业大学 植物保护学院，河北 保定 071001；2．河北农业大学 生命科学学院，河北 保定 O71O01) 摘要：苏云金芽胞杆菌WF~97菌株是从土壤中筛选出的对蚊子幼虫具有特异杀虫活性的新菌株，本研究通过对 该菌株的形态特征、培养特性及杀虫基因型的研究，了解其作为杀蚊制剂的开发应用潜力。在光学显微镜下，观察 该菌株产生球形伴胞晶体 ，SDS检测显示主要表达 27kDa主要蛋 白条带 ，此外 ，还有 131、79、43和 31kDa 等多个较浅的蛋 白条带 。PCR-RFLP分析结果表明，该菌株含有 cry30与 cyt2基因。生物活性测定表明该菌株对 鳞翅 目幼虫小菜蛾、棉铃虫及亚洲玉米螟均无明显的杀虫活性，但对淡色库蚊和 白纹伊蚊 2龄幼虫的杀虫活性高 于标准菌株苏云金芽胞杆菌以色列亚种 。 关键词 ：苏云金芽胞杆菌；杀虫活性 ；cry30；cyt2；蚊子 中图分类号 ：S476。}．11 文献标志码 ：A Characterizationofanew Bacillusthuringiensisstrain withhighactivityagainstmosquitolarvae GUO Li—wei，SUJun-ping ，SONG Ping ，ZHANG Dong—dong ，V NG Qin—ying (1．CollegeofPlantProtection，AgricuhuralUniversityofHebei，Baoding071000，China 2．CollegeofLifeSciences，AgriculturalUniversityofHebei，Baoding071000，China) Abstract：A sporulatingcultureofBacillusthuringiensisisolateWFS-97from soilinHebeiprovinceis toxictolarvaeofmosquito．Inordertodeterminethepotentialvalueasmosquitocide，BtWFS-97was furthercharacterizedbySDS，lightmicroscopy，PCR．BtWFS-97formedthesphericalcrystal observedbyopticalmicroscope．SDSanalysisrevealedfiveproteinbandswithmolecularmasses of131，79，43，31and27kDa，butonly27kDaproteinbandwasprominent．Twonovelcrysta1pro— teingenes，cry30andcyt2，wereidentifiedbyusingthePCR-RFLPmethodinthisisolate．Thebioas— sayresultsindicatedthatBtWFS-97toxinproteinhadhigherinsecticidalactivityagainstsecondinstar larvaeofCulexpipiensandAedesalbopictusthanB．thuringiensissubsp．israelensis．Theisolate showednoanyinsecticidalactivitiesagainstsecond instarlarvaeofHelicoverpaarmigera，Plutell