马生长激素基因多态性与体尺指标之间的关联性分析.pdfVIP

20]3年 第49卷 第3期 GeneticsandBreeding ·谴耀辫 马生长激素基因多态性与 体尺指标之问的关联性分析 蒋钦杨，韦英明，陈宝剑，郭亚芬，蒋和生 (广西大学动物科 学技术学院，广西南宁 530004) 摘 要 ：为研 究广西德保矮马、百色马和新疆伊犁马的生长激素 (GH)基 因多态性与体尺指标之间的相关性，本 实验利用PCR—SSCP技术分析3个品种277匹马GH基 因5侧翼 区、第3外显子、第4外显子、第5外显子 的遗传 多态 性 。结果表 明：只有GH基 因第5外显子 出现 多态性 ，表现为AA、BB和AB3种基 因型，其他片段未发现多态性 。群 体遗传学分析表 明，等位基 因A和B的基 因频率相等 ；Hardy—Weinberg平衡检验显示 ，3个 品种马均处于非平衡状 态 ；它们 的多态信息含量均为 中度多态 。统计分析表 明，GH基 因第5外显子 的基 因型与3个品种马体尺指标之间 无显著相关性 。 关键词 ：G日基 因 ；PCR—SSCP；体尺 指标 ；马 中图分类号 ：$821．2 文献标识码 ：A 文章编号：0258—7033(2013)03—0001—04 生长激素 (GH)是 由脑垂体前叶嗜酸性细胞分 1 材料与方法 泌的一种单肽链的蛋 白质激素，具有广泛的生理功 能，主要是刺激骨 、软骨细胞的生长和分化 ，调节蛋 1．1 实验样 品 选择个体间无直接亲缘关系、年龄 白质、糖 以及脂肪的代谢。GH基因是控制生长激素 在3周岁以上的马作为研究对象，测量体高、体长、 分泌、调节动物生长发育的主效基 因之一 ，在动物生 胸围等体尺指标，颈静脉采集血液5．0mL装入肝素 长轴 中起着关键 的作用 。哺乳动物GH基因一般 由5 抗凝管内，混匀，置于冰盒短暂保存 ，转移至一20℃冰 个外显子和4个 内含子组成 ，其内含子 的位置和长 箱长期保存备用 。德保矮马166匹(广西德保县)，百 度 、启动子 、5端和3端非编码 区，以及编码 的核酸 色马75匹(广西 田阳县)，伊犁马36匹(新疆伊犁市昭 序列均具有较高的保守性 。相关研究表明，奶牛ll_、 苏马场)，实验马均为雌性。 肉牛[、猪 【、羊[】、马_9_、鸡[10-11等畜禽的GH基因多 1．2 引物设计 根据前期克隆的德保矮马和百色 态性与它们的生长性状之间有着较密切的相关性。 马的GH基因全序列，序列对 比分析后，选择可能存 中国马的品种资源十分丰富，列入 《中国马驴品 在碱基差异片段设计PCR—SSCP~I物 ，见表1。 种志》的品种就达33种之多，其 中地方品种马约 占 表1 生长激素基 因片段PCR扩增引物 90％ ]。百色马和德保矮马是我国优 良的地方品种 ， 基眺 … ．一s 位置 属西南马系，其中德保矮马以其矮小体型，清秀外 形，被称为我国标准的矮马品种[13】。新疆伊犁马属培 育品种，体型较高大。国内关于马类分子遗传学方 面的研究文献报道较少 ，尤其是矮马形成的分子机 制以及是否存在主效基因等 问题 尚不清楚。本实验 在前期成功克隆德保矮马_14】和百色马 l5【】G日基因的 基础上 ，采用PCR—SSCP技术研究GH基 因多态性与 体尺指标之间的关联性，为地方品种马的资源保护 和育种工作提供理论参考。 1．3 PCR扩增 采用常规的酚一氯仿抽提DNA法 ， 提取德保矮马、百色马和伊犁马血液样品的总DNA 收稿 日期 ：2o12—03—19；修 回日期 ：2o12—07—05 资助项 目：广西大学科研基金项 目(X