农杆菌介导的小麦芽生长点和分蘖节遗传转化研究.pdfVIP

中国虐亏通提 2013，29(3)：36—41 ChineseAgriculturalScienceBulletin 农杆菌介导的小麦芽生长点和分蘖节遗传转化研究 胡晓晴，郭丽羡，武海娜，赵艳红，王小龙，王睿辉，刘桂茹 (河北农业大学农学院／河北省作物种质资源重点实验室，河北保定071001) 摘 要：为了研究小麦芽生长点和分蘖节为受体的农杆菌转化的可行性，以小麦品种 河‘农827’和 河‘农 58—3’为受体材料，以来 自水稻的OsDREB为供体基因，研究农杆菌介导的小麦芽生长点和分蘖节转化 体 系。结果表明，2种方法均能获得转基因植株：芽生长点侵染法T。代的成活率低(30．02％)，转化率高 (PCR检测转化率达 13．79％)；分蘖节注射法T0代成活率高(100％)，转化率低 (PCR检出率为3．25％)，综 合比较2种方法的转基因效率，芽生长点侵染法为2．65％，分蘖节注射法为3．25％。对野生型小麦卡那 霉素抗性筛选，确定了转基因小麦卡那霉素的筛选浓度为90mg／L较为合适。芽生长点侵染法共培养 过程中的抑菌，加入羧苄青霉素的最佳浓度为300mg／L，有利于共培养后外植体有较低的染菌率。 关键词：小麦；农杆菌；遗传转化；芽生长点；分蘖节 中图分类号：S5 文献标志码 ：A 论文编号：2012．0587 Agrobacterium tumefactions-mediatedGeneticTransformationofApicalM eritedand TilleringNodeinBreadW heat HuXiaoqing，GuoLixian，WuHaina，ZhaoYanhong，WangXiaolong，WangRuihui，LiuGuiru (AgriculturalUniversityofHebeiCollegeofAgriculture~KeyLaboratoryof CropGermplasmResourcesofHebei，BaodingHebei071001) Abstract： In order to research the wheat apical merited and tillering node of Agrobaeterium tumefactions—mediatedtransformationforthereceptorsoffeasibility，genetictransformationofOsDREBgene fromrice(Oryzasativa)intotwowheatvarietiesmediatedbyAgrobacterium tumefactionswasstudiedwith wheatapicalmeritedandtilleringnodeasexplants．Theresultsshowedthat，bothmethodscouldobtainthe PCR—positivetransgenicplants：survivalrateofrTogenerationwithapicalmeritedwaslower(30．02％)than that(100％)ofTogenerationwithtilleringnodeinjection，buttransformationratio(13．79)ofrtheapicalmerited methodwashigherthanthat(3．25％)oftilleringnodemethod．Theoptimum concentrationofrkanamycin treatmentwas90mg／Lbythewild-typekanamycin—resistancescreening．Theoptimum carbenicillinwas 300mg／L toinhibitthegrowthofAgrobacterium tumefactionsduringtheCO——culturebybudgrowing