食源性致病菌活菌检测技术研究进展.pdfVIP

中国动物检疫2011年第28卷第10期 — ·黻 -63—— 墨闺 鲞持人：袁丽萍 ylp652@h。缸I1ai1．c。m 食源性致病菌活菌检测技术研究进展 邱 杨 ，田 聪 ，余以刚 ，肖性龙 ，李聪聪 ，刘建丽 ，赵 丽 ，梅艳群 (1．东莞出入境检验检疫局，广东东莞 523072；2．华南JEX．大学轻工与食品学院，广东广州 510640) 摘 要：食品中的病原茵引起食源性疾病，影响食品安全。能够有效区分死茵和活茵的检测方法在实际运用中具有指导意义， 食源性致病菌检测技术向着快速、简便、特异的方向发展。本文依据检测原理介绍了活茵检测技术的研究进展。 关键词：致病菌；活茵；检测；培养；代谢活性 中图分类号：TS207．4 文献识别码 ：B 文章编号：1005．944X (2011)10．0063．03 近年来，国内外食源性疾病事件频频发生，对食 对照系统的困难，也存在对持留菌、休眠菌及代谢异 源性疾病的预防与控制己引起了世界各国关注。提高 质菌无法成功培养的缺陷 [1】。 食源性致病菌活菌检测方法的速度、效率和灵敏度 2 以新陈代谢活力作为活菌标准的检测方法 尽管不能完全解决食品安全问题，却可以起到预防与 2．1 ATP生物发光法 控制食源性疾病的作用。在 自然环境中，微生物 以多 细胞 内源性ATP含量可 以反映细胞的活性和活 种生理状态存在：可培养的活菌，活的非可培养状态 细胞的数量。微生物细胞释放 出的ATP与荧光素在 (、，】3NC)，具有完整结构但无生物活性的死菌(Ghosts) 镁离子和萤火虫荧光素酶的催化作用下可以产生荧 以及细胞膜损伤死菌(Membranecompomised)。如何 光，荧光强度与ATP含量成正比。同时ATP含量与 区分活菌与死菌，致病菌与非致病菌所造成的污染是 活的微生物数量直接相关，通过荧光检测仪可以利用 有效检测食源性致病菌的关键环节。传统检测方法把 发光强度来间接测定活菌总数。唐倩倩等 啪建立了 细菌是否可培养作为判断的标准，实际操作中可能会 Ec O157：H7与光源计数值的定量线性模型，证 明 发生漏检等情况。随着研究的不断深入，活菌的快速检 ATP生物发光法与传统的细菌培养方法有 良好的线 测新技术不断出现，人们将细胞是否具有新陈代谢活 性，相关性， =0．9608，P0．001。ATP生物发光法 性进而产生生物活性物质，或是是否具有完整的细胞 检测限比一些致病菌的致病浓度高，免疫磁分离技术 结构作为判断活菌的标准。下面主要对食源性致病菌 与ATP生物发光法相结合可以提高检测的灵敏度，这 活菌检测最新研究作一概述。 种方法当前 已经成为研究热点。 1 以可培养作为活菌标准的检测方法 由于ATP生物发光法简单快速，被广泛的应用于 传统培养法被认为是食品检测的“金标准”，在食 食品卫生、化工、环境等领域。但是，ATP生物发光法 品微生物分析中需要多步完成(如前增菌，选择性增 只能用于细菌总数的快速测定，不能用来鉴定菌种。 菌，分离纯化)，再用生物化学，分子生物学检测进一 而且，ATP生物发光法中涉及ATP的提取和酶促反 步确认。 应，使得检测结果受到多种因素的影响。在检测实际 培养法程序繁杂、耗时长，样本中可能含有杂菌 食品样品时，食品中含有的其他生物游离出来的ATP 而产生竞争性抑制，或者由于存在干扰性物质而使细 可能干扰总ATP含量的测定。另外，缓冲液种类、盐、 菌培养不出来，使得阳性检出率受到很大影响，不能 pH、温度等因素对生物发光反应有一定的影响。 满足市场快速准确的要求。同时，培养法敏感，但检测 2．2 生物传感器 培养法的