中国东海亚硫酸杆菌属微生物的鉴定及生物学活性分析.pdfVIP

第二军医大学学报 2009年 10月第 30卷第 10期 http：／u- ．afiSITIDlU．f AcademicJournalofSecondMilitaryMedicalUniversity，Oct．2009，Vo1．30，No．10 DO1：l0．3724／SP．J．1008．2009．01106 · 论 中国东海亚硫酸杆菌属微生物的鉴定及生物学活性分析 龙 聪 ，卢小玲，刘军华，高 云，焦炳华 ，刘小宇 第二军医大学基础部生物化学与分子生物学教研室 ，上海 200433 [摘要] 目的 ：对44株 中国东海来源的亚硫酸杆菌进行 16SrDNA的序列测定和生物学活性的初步分析。方法 ：用 PCR方 法对细菌 的16SrDNA序列进行扩增，并在 GenBank上进行相似性搜索。将全部亚硫酸杆菌 的 16SrDNA序列运用 Clustal x1．8软件进行多序列比对并用 MEGA4．1绘制进 匕『树 。利用稻瘟霉菌 (Pyriculariaoryzae)P一2b、枯草芽孢杆菌 (Bacillus “btili)和大肠埃希菌 (Esc^erichiacoli)作为指示菌检测菌株发酵液 的抗菌活性 。以HI一60、HepG2细胞作为细胞毒活性指 示细胞株检测菌株发酵液的细胞毒活性 。采用 ABTS和 DPPH抗氧化模型检测菌株发酵液的 自由基清除能力。结 果 ：经与 GenBank数据库 比对，44株菌均与亚硫酸杆菌属有很高 的相似性 (97 ～100 )。所有菌株发酵液对指示菌未显示 出抗菌活 性 。菌株发酵液有不 同程度 的细胞毒活性和清除 自由基 的能力。19株菌 的发酵液对 HepG2细胞有抑制作用 ，抑制率为 6．8 ～42．8 ，18株菌的发酵液对 HI，6O细胞有抑制活性 ，抑制率为 6．9％～43．6 。12株菌 的发酵液对 ABTS自由基有 清除能力 ，清除率为4．49％～23．O8 ，8株菌发酵液对DPPH 自由基有清除能力 ，清 除率为 1．23 ～3O．76 。结论 ：44株 中国东海来源 的亚硫酸杆菌表现 出显著的细胞毒活性及抗氧化活性，具有潜在 的药用价值。 [关键词] 亚硫酸杆菌；鉴定；细胞毒性；自由基清除 [中图分类号] R931．77 [文献标志码] A [文章编号] 0258—879X(2009)10一l106—04 IdentificationandbiologicalactivityscreeningofSHtfitobnctersp．fromEastChinaSea I()NG Cong，LU Xiaoling，LIU Jun—hua，GAO Yun，JIAO Binghua ，I1U Xiao—yu DepartmentofBiochemistryand MolecularBiology。CollegeofBasicM edicalSciences，Second Military M edicalUniversity， Shanghai200433，China EABSTRACT] Objective：Todeterminethel6SrDNA sequencesof44strainsofSulfitobactersp．obtainedfrom theEast ChinaSeaandtostudytheirbiologicalactivities．M ethods：PCR wasusedtoamplifythe16SrDNA sequencesofthe44strains， andtheobtainedsequencesweresubjectedtoGenBanksimilaritysearch．Themultiplesequencealignmentofthe44strainswas donebyClustalX1．8andMEGA4．1．TheantibacterialactivitiesofSulfitobactersp．fermentationbrothsweretestedusingthe following indicator bacteria：Pyricularia oryzae，B