5-Aza-CdR体外诱导人肺癌细胞株p16基因去甲基化.pdfVIP

江西医学院学报 2 00 9 年第 49 卷第 5 期 　 Act a Academ i ae M edi cin ae J i a ng xi 2009 , Vol 49 , No 5 ·47 · 52Aza2Cd R 体 外 诱 导 人 肺 癌 细 胞 株 p 16 基 因 去 甲 基 化 a b b b 王 　群 ,刘季春 ,曾尚干 ,曾　梁 (南昌大学 a . 研究生院医学部 2006 级 ; b . 第一附属医院心胸外科 ,南 昌 3300 06) 摘要 : 目的 　观察人肺癌细胞株 H 719p 16 基 因启动子区 甲基化状态 ,并探讨 去甲基 化制剂 52氮杂22 ′2脱氧胞苷 ( 52A za2CdR) 诱导 H7 19 细胞株高甲基化失活的p l6 基因重新表达的可能性 。方法 　M SP 法检测体外培养的人肺 癌细胞株 p 16 基因启动子 区甲基化状态 , 并应用不同浓度的 52Aza2CdR 处理人肺癌 细胞株 H7 19 ,M SP 法检测用 药后细胞中p 16 基因的甲基化状态 ,并用 RT2PCR 方法及 est ern Blot 方法检测用药前后细胞中p 16 基因 mRN A 和蛋白水平变化 。结果 　p 16 基因在人肺癌细胞株 H7 19 中启动子区呈 甲基 化状态 ,经过 52A za2CdR 处理后 , p 16 基因启动子区呈去甲基化状态 ,并且其 m RNA 及蛋白恢复表达 。结论 　启动子区异常甲基化是人肺癌 细胞株 p 16 基因失活的可能原因 , 52Aza2CdR 能逆转 p 16 基 因甲基化状态 。 关键词 : 52氮杂22 ′2脱氧胞苷 ; p 16 基因; DNA 甲基 化转移酶抑制剂 ; DNA 去甲基化 中图分类号 : R7 34 . 2 　　　文献标识码 : A 　　　文章编号 : 1000 - 22 94 (2 00 9) 05 - 004 7 - 04 52Aza2Cd R In duced Demet hylat ion of p 16 Gene in Human L un g Can cer Cell L in es AN G Qun a ,L IU J i2chun b , ZEN G Shan g2gan b , ZENG L ian gb (a . 2 006 G r a de o f M e d ic al D ep a r t ment of Gr a d u ate School ; b. D ep a r t ment o f T hor acic S u r g er y , t he F i rs t A f f i li ate d H os pi t al , N anch an g U ni ver si t y , N a nc han g 3 30006 , Chi n a) ABSTRACT : Obj ect ive 　To in vesti gat e t he met hyla tion st at us o f p 16 ge ne p ro mote r in hu man l un g cancer cell line H 719 an d t o exp lore t he po s si bilit y of re2e xp re ssio n of t h e hyp ermet hylat ed an d sile nced p 16 gene . Met hods 　Met hy lation2specific PCP ( MS P) wa s u