银杏铁型超氧化物歧化酶基因(GbFeSOD)的克隆与表达.pdfVIP

银杏铁型超氧化物歧化酶基因(GbFeSOD)的克隆与表达.pdf

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果 树 学 报 2009,26(6):840~846 JournalofFruitScience 银杏铁型超氧化物歧化酶 基因(GbFeSOD)的克隆与表达 李琳玲 ,程 华 ,许 锋 。,王 燕 ,常 杰 ,程水源 (河北农业大学园艺学院,河北保定 071001;黄冈师范学院生命科学与工程学院.湖北黄冈 438000; 长江大学园艺园林学院,湖北荆州 434024) 摘 要:利用RACE技术从银杏 中克隆到叶绿体铁型超氧化物歧化酶 (GbFeSOD)基 因cDNA全长 GbFeSOD的 cDNA全长 1106bp(GenBank:FJ555019),含有一个 720bp的最大读码框 。三维结构预测显示 .GbFeSOD含有 l1个 仅螺旋和 3个 B折叠构成的篮子状活性 中心。GbFeSOD氨基酸序列与其他植物的FeSOD具有很高的相似性 。进化 树分析表明GbFeSOD和其他物种起源相同。Southern杂交显示 ,GbFeSOD属于一个小的多基因家族 。Northern杂交 表明GbFeSOD在银杏的茎 、叶中的表达量最高 ,果中表达量最小 ,在根中没有表达 。ABA、渗透物质处理 、低温和高温 均能诱导 GbFeSOD表达量增加 ,其 中4℃低温诱导增加缓慢 ,40℃高温诱导迅速而稳定 ,而 44℃培养条件下, G6FeSOD表达量呈先增后降的现象。 关键词 :银杏 ;FeSOD基因;表达分析 中图分类号:$664.3 文献标识码:A 文章编号:1009—9980(2009)06—840—07 M olecular cloning,characterization and expression of iron superoxide dismutasegenefrom Ginkgobiloba LILin-ling一,CHENGHua一,XUFeng。,WANGYan ,CHANGJie,CHENGShui—yuan (JCollegeofHorticulture,HebeiAgriculturalUniversit),Baoding,Hebei071001China;。Collegeof£rieScienceandEngineering,Huang- gnagNbrmolUniversityHuanggang,Hubei438oo0China;3CollegeofHorticultureandGardening.YnagtzeUniversityJingzhou.Hubei 43402 China) Abstract:Thefull—lengtheDNAsequenceofGinkgobilobaL.ironsuperoxidedismutasegene(GenBank:FJ555019)was isolatedfrom Ginkgobiloba.Thefull-lengtheDNAofGbFeSODcontaineda720bpopenreadingframe(ORF).The3D structuremodelingshowedthatGbFeSOD contained l1helixesand3sheetsandhadabasketrymotifintheenzymecore. PhylogenetictreeanalysisrevealedthatGbFeSODsharedthesameancestorwithotherFeSOD.TheresultofSouthernanaly— sisshowedthatGbFeSOD genewasencodedwithasmallgenefamilyinGinkgobilobcaNorthernhybridizationanalysis showedthatGbFeSOD hadthehighestexpressioninleaves,theninstem ,andtheleastinfruit.TherewasnoexpressionNund inroots.TheexpressionofGbFeSO

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