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清毒汤对TAA致肠源性内毒素血症大鼠肝脏库普弗细胞CD14和清道夫受体表达的影响.pdf

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主医药 Q 生 12月 筮 Q鲞筮 2期 旦 堕g T—rad—itiona_1.ChineseMedicine,December2Q!!.y!:Q Q:12 · 实 验 研 究 · 清毒汤对TAA致肠源性内毒素血症大鼠肝脏 库普弗细胞CD14和清道夫受体表达的影响术 高连印 车念聪 王融冰 :张秋云 付修文 杜宇琼 摘【要】目的 观察清毒汤对硫代乙酰胺(TAA)所致肠源性内毒素血症模型大鼠肝脏库普弗细胞CD14和清道夫受体表达的 影响。方法 建立TAA所致大鼠肝损伤内毒素血症模型,以清毒汤进行干预,免疫组化法观察肝脏库普弗细胞CD14及清道夫受 体(sR)表达的变化,并进行图像分析和肝组织的病理检测。结果清毒汤能明显降低内毒素的含量,与模型组、正常对照组比较 差异有统计学意义(PO.O1);清毒汤能抑制大鼠肝脏库普弗细胞表面CD14表达上调以及 sR表达下调 ,与正常对照组和模型组 比较差异有统计学意义 (P0.05)结论 清毒汤对TAA所致肠源性内毒素血症模型大鼠肝脏库普弗细胞表面CD14表达上调以 及SR表达下调有明显的抑制作用,并能减轻内毒素所致的肝损伤 【关键词】清毒汤;内毒素血症;CD14;清道夫受体 研究表明[1--21,巨噬细胞表面清道夫受体 (SR)是 1.4实验 仪 器 重要的防御性受体,参与内毒素的清除和灭活作用。 752N型分光光度计,上海精密科学仪器有限公司 CD14则是内毒素激活巨噬细胞的主要受体,与细胞 生产;TGL一16G型高速台式离心机,上海医用分析仪器 释放炎症介质有关。因此,在内毒素血症过程中,肝内 厂生产;AEG一220电子分析天平,日本Shimadzu公司; 库普弗细胞 (KC)表面SR表达下调、CD14表达上调 LEICAASP300全 自动脱水机:德国;kkNIS—Elements 可能是促使 KC由防御性逐步转化为效应性细胞的 BasicResearch图像采集分析系统:日本。 重要机制。前期研究已证实清毒汤对硫代乙酰胺 2方法 (TAA)所致大鼠肝损伤具有保护作用[3]。为了进一步 2.1模型制备 研究清毒汤清除慢性重症肝病肠源性内毒素的作 将3O只实验大鼠按体重随机分为正常组 10只和 用,笔者采用 TAA所致肝损伤模型,予清毒汤进行 造模组20只。前8周给予造模组大鼠12mg/kg/d的 干预,观察其对模型大鼠肝脏库普弗细胞表面CD14 TAA,造模第9周、第 lO周调整TAA剂量为36mgk/g/d 和SR表达变化的影响,现报告如下。 灌胃正常组给以同等容积的生理盐水灌胃。实验条件下 l材料 自然饮食道模 12周后夜间断食次 日麻醉、取材。 1.1动物 2.2动物分组与给药 Wister雄性大鼠30只,体重200~250 清洁级, 将2O只造模大鼠随机分为模型组、清毒汤治疗 北京维通利华实验动物技术有限公司提供,许可证 组 (5.95g/Kg)各 10只,疗程4周。模型大鼠自第9 号SCXK(5~.)一2008—0003。 周开始连续灌 胃给药4周,每 日1次。 1.2药物 2.3免疫组化标本的准备 清毒汤 :由大黄、枳实、厚朴、生地等药物组成, 肝脏以10%甲醛固定24h后,常规石蜡包埋切 常规水煎制,原药材含量为 1.1gm/L。 片,切片厚5 m,行免疫组化显色和HE染色。 1.3主要试剂 2.4CD14、SR 检 测 TAA,~[t京化学试剂公司

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