雷帕霉素体外促进小鼠调节性T细胞的分化和增殖.pdfVIP

第二军医大学学报 2009年 l0月第 30卷第 l0期 http：／／ u’．ajm， CH · 1136 · AcademicJournalofSecondMilitaryMedicalUniversity，()e1．2009，Vo1．30，No．10 DOI：10．3724／SP．J．1008．2009．01136 · 论 著 · 雷帕霉素体外促进小 鼠调节性 T细胞 的分化和增殖 谢江平 ，丁国善，倪之嘉，傅 宏 ，傅志仁 第二军医大学长征医院器官移植科 ，全军器官移植研究所 ，上海 200003 [摘要] 目的 ：观察雷帕霉素体外对小鼠调节性T细胞(regulatoryTcells，Treg)分化和增殖的影响。为进一步探讨其可能的 免疫耐受诱导机制奠定基础 。方法 ：无菌条件下取 C57BI／6小 鼠脾脏 ，分离单个核细胞，免疫磁珠 阴性分选获得 CD4 T细 胞，分别与0．1 mol／I雷帕霉素(RAPA组)、0．5 mol／L环孢素(CsA组)进行共培养 7d，并 以正常培养细胞怍为空 白对照。 流式细胞仪检测备组 CD4 CD25 Treg细胞 比例；RTPCR检测各组 T细胞 Foxp3mRNA表达水平 。结 果 ：与空 白对照 [(7．42±0．82) ]相 比，CsA组 CD4 CD25 Treg细胞[(3．72士0．74) ]所 占比例 明显降低 (P0．01)；RAPA 组 CD4 CD25Treg细胞[(11．47土1．08) ]所 占比例 明显升高(P0．01)。RAPA 组 T细胞 Foxp3mRNA表达 明显高于 CsA 组和 空 白对照(P0．01)；CsA组 Foxp3mRNA表达低于空 白对照(P0．05)。结论 ：雷帕霉素体外可促进 CI)4 CD25 Treg细 胞的分化和增殖，育利于免疫耐受的形成，其免疫抑制机制不同于CsA。 [关键词] 调节性T淋巴细胞；雷帕霉素；环孢素A；Foxp3；体外；细胞分化；细胞增殖 [中图分类号] R979．5 [文献标志码] A [文章编号] 0258—879X(2009 RapamyeinpromotesdifferentiationandproliferationofmouseCD4 CD25 regulatoryT cellsinvitro XIEJiangping，DINGGuoshan，NIZhi]ia，FU Hong ，FU Zhi—ren DepartmentofOrganTransplantation，OrganTransplantation InstituteofPIA ，Changzheng Hospital，SecondM ilitaryM edical University，Shanghai200003，China [ABsTRAcT] 0 ective：ToobservetheinfluenceofrapamycinonthedifferentiationandproliferationofCD4 CD25。’Treg cells，soastolayafoundationforfurtherstudyingitsroleininducingimmunetolerance．M ethods：Thespleensweretakenfrom C57BL／6miceundersterileconditionandthemononuclearcellswereisolated．CD4 T cellswereisolatedbyimmunomagnetic beads(negative)andweredivideintonormalcontrolgroup，rapamycin (0．1ffmol／L，for7days)groupandcyclosporine(0．5 ffmol／l，for7days)group．Flow cytometrywasusedtodeterminetheproportionsofCD4 CD25 Tregcells．andRT—PCRwas usedtoexaminetheexpressionofFoxp3mRNA．Results：Comparedwiththecon