非选择性阳离子通道在根系钾离子跨膜转移中的调控机制探索.pptVIP

非选择性阳离子通道在根系钾离子跨膜转移中的调控机制探索 王玉倩 导师:封克 1、立题依据 2、研究内容 3、研究目标 4、拟采取的研究方案及可行性分析 1、立题依据 离子通道简介 概念与功能 离子通道：细胞膜上的特殊蛋白质大分子，在脂质双层膜上构成具有高度选择性的亲水孔道，从而允许适当大小和适当电荷的离子通过。 功能：1）在短期内渗透调节重要的离子流； 2）沿细胞膜或跨细胞膜传递信号； 3）控制细胞跨膜电势差即膜电位。 分类 选择性钾离子通道 非选择性离子通道 非选择性阳离子通道(nonselective cation channels－NSCCs） NSCCs具有高选择性阳离子通道所不具备的优点。 2、研究内容 1）通过NSCCs途径的K+、Na+ 、Ca2+ 平衡机制 植物的抗盐能力与植物体内的钾、钠平衡有关，而钙离子可以对此加以调节。Na+、Ca2+ 的转移不能通过钾离子选择性通道，因此钾钠的平衡和Ca2+ 的调节过程必然通过NSCCs转运系统进行。不同抗盐能力的植物是否在NSCCs的钾、钠平衡过程中有自己的特点，还未见报道。该部分研究内容主要包括： K+、Na+ 对不同植物根系NSCCs的竞争作用； Ca2+ 通过NSCCs对K+、Na+ 平衡 的调控作用。 （2）无机阳离子对NSCCs途径吸钾的调控机理 目前已发现一些无机离子（如La3+, Gd3+ 等）可以影响NSCCs的开闭，但其调节究竟是通过影响H+-ATPase的活性从而影响膜电位（电控）变化还是与NSCCs的某个部位发生化学反应进而控制其开闭（化控）还无系统研究。本部分研究内容主要包括： 对K+ 的NSCCs转移具有抑制作用的阳离子种类； 抑制机制的探讨。 （3）有机物对NSCCs途径吸钾的调控机理 多种有机物质可以影响NSCCs的开闭，如ABA、戊脉安、奎宁、环化核苷和一些氨基酸等，但它们是通过电控还是化控来调节NSCCs的开闭或兼而有之还没有明确报道。该部分研究内容主要包括： 对钾离子通过NSCCs转移过程具有明显调节作用的有机物质有哪些？ 抑制机制的探讨。 3、研究目标 明确不同阳离子在竞争NSCCs时的相互关系，初步揭示不同抑制因子影响NSCCs开闭的机理，为从分子生物学角度进一步深入研究NSCCs提供基础资料 拟解决的关键问题 正确鉴别出不同化学物质调控NSCCs的开闭过程究竟是直接与通道的某个部位发生了反应而使通道关闭，还是该物质影响了膜电位后间接导致了有关通道的关闭。由于某些化学物质本身带有电荷，在进入细胞后也能同时造成膜电位的变化。对此，我们拟采用测定离体细胞H+-ATPase活性是否受化学物质影响的方法解决这个问题。因为膜电位主要是由细胞膜上的H+-ATPase所维持的，因此如果一种抑制物质可以造成某些NSCCs的关闭并同时伴有膜电位的改变，但只要它并不影响离体细胞H+-ATPase的活性，这种抑制就是该物质与通道的反应产物对通道的直接抑制，而不是由于细胞膜电位变化所引起的通道关闭。 4、拟采取的研究方案及可行性分析 内容（1）实验方案：（通过NSCCs途径的K+、Na+ 、Ca2+ 平衡机制） 内容（2）实验方案：（无机阳离子对NSCCs途径吸钾的调控机理） 内容（3）实验方案：（有机物质对NSCCs途径吸钾的调控机理） 可行性分析 * * 植物根细胞与环境之间的物质交换通过位于细胞质膜上的转运系统进行。转运系统主要包括各类离子泵、共运转体和离子通道。由于离子通道可快速转运营养物质以及控制水、离子和其它小分子溶质进出细胞，从而决定着许多关键的细胞功能。 根据它们对所转移离子的专一性程度可分为： 选择性离子通道 非选择性离子通道 选择性离子通道是生物在进化过程中的产物，它的存在使生物与外界的物质与能量交换效率大大提高。因此在过去的研究中，人们对选择性离子通道更为关注。 选择性钾离子通道是离子通道中的一个主要种类，它对钾离子具有相对于其它离子的高度选择性，已在多种植物细胞中被发现。现已证实，钾离子的跨细胞膜运输主要通过两种途径： 由K+ 载体蛋白组成的高亲和转运系统（载体运输） 由K+ 通道蛋白组成的低亲和转运系统（通道运输） 其中载体运输系统仅在外界钾离子浓度很低时起作用（0.001～0.2mmol.L-1），在一般的钾供应条件下，主要由钾 通道负责钾的吸收。 然而，实验室已有研究发现，添加钾载体和钾通道的专性抑制剂后，植物并未象原先预想的那样停止对溶液中钾离子的吸收。与未加抑制剂的对照相比，仍有高达60％以上的钾在相同时间