用hMT—Ia基因作选择标记基因在BPV载体中表达HBsAg的研究.pdfVIP

维普资讯 北京大学学报 (自然科学版)，第26卷，第 1期，1∞0年 Aeta Soientiarum Naturallum UniverBitatisPekinensis．Vo]．26，№ 1 (1990) 用hMT—Ia基因作选择标记基因在 BPV 载体中表达 HBsAg的研究 温晓燕 阮 力 任 贵方 (中国预防医学科 学院病毒所) 摘 要 用磷酸钙沉淀技术把构建的 pBMT3XR质粒导^培养的 c 细胞内，在 CdCI的选择压力 下，获得了 HBsAg的表达。实验还证实 MT调控的 HBsAg的表达仍受重金属离子 c 的诱导 调节。 关t词 基 因表达，己型肝鼗表面抗原 ·金属蔬基蛋白 1．引 言 乙型肝炎是一种严重危害人类健康的传染病，由于其传染性强， 目前又无有效的药物治 疗方法，而且，慢性乙型肝炎有发生癌变的可能，因此，通过疫苗接种来预防乙型肝炎的发 生显得尤为重要。乙型肝炎表面抗原 ‘(HBsAg)是一种保护性的抗原，它能刺激机体产生中 和抗体，可 以用 tlBsAg来制备乙型肝炎疫苗。由于血源的乙型肝炎疫苗生产应本高，正在 被新兴的基因工程疫苗取代。继1980年 Dubois 在 LTK一细 胞 中表 达 了 HBsAg之后， Moriarty” 和 Stenlund 又在不同的载体一 受体细胞体系中表达了 HBsAg。 金属巯基蛋 白 (Metallothionein，简称 biT)启动子是一个强启动 子，它又受多种重金 属离子、激素、干扰素等因子的诱导调节，它在真核基 因工程领域应 用甚广 。我们把 鼠 MT 启动子与 HBsAg基因进行了融台，傲了 HBsAg基因表达的研 究。另外，由于金属巯 基蛋白能与重金属离子结合，使细胞免千重金属离子的毒性，可以用 MT基因作选择标记 基因。本文就是用 hMT—la基因作选择标记获得了 H Ag的表达。 ‘r ． 材料和方法 ． 2．1． 质牡和菌种 质粒 pBMT3XR 由以下几个部分组成 (见图1)： (I)来源于鼠的金 属巯基 蛋白基 因 (mMT—I)，其 mMT启动子下游的 XhoI位点是外源基因的插入位点 (2)作为选择 现通讯地址：北京大学生物学系 奉文1988年12月20B牧到 维普资讯 110 北 京 大 学 学 报 第26卷 啦 — 。 1neno enEyⅢe ’Xh。I U m I 仨习，_—■出—■—__—衄 I 蛳