皮肤致敏反应体外替代方法的研究现状.pdfVIP

第 29卷 第 6期 实验动物科学 Vo1．29 No．6 2012年 12月 LABORATORY ANIMAL SCIENCE December2012 驴 驴 研究进展 ≯、 、2芦 皮肤致敏反应体外替代方法的研究现状 洪丽玲 周庆云 (上海化工研究院 ，上海 200062) 摘要：皮肤是人体最大的器官，也是外源化学物入侵机体的第一道天然屏障。化学物作用于皮肤常常导致接触性 过敏性皮炎。传统上常常采用豚 鼠致敏试验来评价化学物的致敏性。然而，动物试验周期长，结果主观性强，变异 程度大，加之如今动物保护主义对动物福利的呼声高涨，替代试验成为必然的发展趋势。本文拟就近年来在皮肤 变态反应研究中的替代试验方法进行综述。 关键词：致敏反应；体外替代方法 中图分类号：Q95—33 文献标识码 ：A 文章编号：1006—6179(2012)06-0060-04 皮肤致敏反应是指通过重复接触某种化学物后 引流淋巴结细胞 的增殖 ，以反映化学物 的致敏性。 机体产生的免疫传递反应。许多化学物都含有变应 该法不需要靠激发出动物皮肤的红斑水肿来作出判 原或可作为半抗原与表皮细胞蛋 白结合后形成抗 断 。因而与 BT和 GPMT相 比具有优化、减少 、快 原 ，人体接触致敏物后 ，经机体免疫系统反应 ，产生 速 ，以及观察指标定量客观 、更多考虑了动物福利等 T细胞介导的皮肤组织损伤，属Ⅳ型(延迟型)变态 优点。但由于现行 的LLNA需要放射性核素 ，易造 反应 。常用的检测方法有两种豚鼠试验 ，即局部封 成环境污染 ，因此需对终点测定方法进行改进。 闭涂皮法 (BT)和豚 鼠最大值法 (GPMT)，但这两种 2010年 ，OECD又增加 了两种新 的方法 ，即LLNA： 方法存在系统主观性较强、所需动物数量多和实验 DA(由DaicelChemicalIndustries，Ltd．发展起来 的) 周期长等不足。 方 法 (TG442A) 和 LLNA：Brdu．ELISA 方 法 随着大量新型化学物 的出现，生产者和消费者 (TG442B)。然而 ，后来 的研究显示 LLNA可能高估 将会接触到更多具有潜在致敏性的化学物 ；加之近 了化学物的致敏性 ，对某些无致敏性 的化学物质也 年来动物福利原则的推行，使得建立可靠的体外评 观察到了未预期 的阳性结果 。例如表面活性剂 、 价化学物致敏性的方法成为焦点。近年来通过对化 硅聚合物以及多元醇等化学物在豚鼠试验 中显示无 学物皮肤致敏的分子和细胞作用的深入研究，出现 致敏性，而 LLNA试验产生 了阳性结果。再者 ， 了可以对化学物潜在致敏性进行识别和分类的新的 LLNA不能很好 的说明淋 巴细胞增生是 因为致敏作 替代方法。 用还是来 自刺激反应。因此 ，有研究改进 了试验方 法 ：增加刺激性指标如耳缘厚度和耳活组织的检测 ； 1 体 内替代试验 分析免疫表型B220+，CD23+，CD69+等；将淋 巴 结增殖情况 (称重和计数)纳入致敏性指标 。 啮齿类动物试验主要是使用小 鼠替代豚 鼠，局 部淋巴结试验(LLNA)就是一种很好的体 内替代方 2 体外替代试验 法，并已被 OECD(经济合作与发展组织)所收录