自组装溶液酸度对L-半胱氨酸自组膜的结构与性能的影响.pdfVIP

第 35卷第 4期 辽宁师范大学学报 (自然科学版) Vo1．35 NO．4 2O12年 12月 JournalofLiaoningNormalUniversity (NaturalScienceEdition) Dec． 2012 文章编号 ：1000-1735(2012)04—0504—04 自组装溶液酸度对厶．半胱氨酸自组膜的结构与性能的影响 冯春梁 ， 李娜娜 ， 王今朝 ， 杨晓庆 ， 田庆斌。 (1．辽宁师范大学 化学化工学 院 功能材料化学研究所 ，辽宁 大连 116029； 2．大连市第 24中学 化学教研室 ，辽宁 大连 116001) 摘 要 ：L．半胱氨酸(L-Cys)自组装单分子膜(SAM)已在化学传感器及生物传感器研究领 域得到了广泛应用．但是，L-CysSAM 容易通过静电吸附或分子间氢键形成二聚体，而降 低表面功能基团的活性，进而对生物传感器的性能产生不利影响．首先在不同pH条件下， 将L—Cys自组装在金电极表面，用循环伏安法、交流阻抗法和偏振模式傅里叶变换红外反 射吸收光谱法对L—CysSAM 进行表征．结果表明，在pH 3．0的醋酸盐缓冲溶液中于金表 面上制备L-CysSAM 可以较为有效的抑制二聚体的形成 ，为蛋 白质的固定化提供 了理想 的界面，为进一步制备免疫传感器、酶传感器等生物传感器提供 了技术支持． 关键词 ：L一半胱氨酸；自组装单分子膜 ；生物传感器 中图分类号：T$251．51 文献标识码 ：A 生物活性材料在转换器上的组装是制备生物传感器的关键技术之一，自组装单分子膜 (SAM)为 生物材料的固定化提供 了一种有效途径．利用 SAM 分子末端基 团(一COOH、一0H、一NH。、一SH 等)的反应活性，可将生物活性分子以共价键形式 固定在 自组装膜电极上[1]．L一半胱氨酸 (L—Cys)既能 溶于酸又能溶于碱 ，具有 良好的电化学活性 ，可通过 S—Au键在金电极表面形成有序稳定的 自组装单 分子膜 (L—CysSAM)[2-4]，其表面上的一COOH和一NH：又可通过耦联法或交联法与蛋 白质分子发生 共价结合[5]．利用不同种类 的生物材料 ，可设计制备多种生物传感器．但是 ，自组装溶液的酸度、自组 装时间等条件对L—CysSAM 的结构和性能都会产生影响 ，进而影响蛋 白质分子的固定化． 本文主要报道L-Cys自组装溶液的酸度条件对L-CysSAM 的结构和性能的影响．首先在不同pH条 件下 ，将 L—Cys自组装在金电极表面，用循环伏安法 (CV)、交流阻抗法 (EIS)和偏振模式傅里叶变换红外 反射吸收光谱法 (PM-FT-IRRAS)对 L-CysSAM 进行表征，结果表明，在 pH 3．0醋酸盐缓冲溶液 ( ) 中在金表面上制备的L—CysSAM 分子间形成的二聚体最少 ，以单体形式存在的分子最多 ，为蛋白质的固 定化提供了理想的界面，为进一步制备免疫传感器、酶传感器等生物传感器提供了实验条件． 1 实验部分 1．1 仪器与试剂 CHI660C电化学工作站(I-海辰华仪器公司)；TENSOR27红外光谱仪 (BRUKER公司 德 国)； PHS一3C精密酸度计(上海精密分析仪器公司)；HumanLIP900超纯水系统(Human公司韩国)． L一半胱氨酸 (科密欧公司，天津)；牛血清蛋白(BSA，北京元亨圣马生物技术研究所)；1一(3一二 甲氨 收稿 日期 ：2012—05—21 基金项 目：国家 自然科学基金项 目；辽宁省教育厅高校重点实验室项 目(2008S134) 作者简介 ：冯春梁(1956一)，男，辽宁岫岩人 ，辽宁师范大学教授． 第 4期 冯春梁等： 自组装溶液酸度对 L一半胱氨酸 自组膜 的结构与性能的影响 505 基丙基)一3一乙基碳二亚胺盐酸盐 (EDC)，N一羟基硫代琥珀酰亚胺 (NHS，Sigma公司 ，上海)；实验用水 均为超纯水 ；实验在室温下进行． 1．2 L-半胱氨酸 自组装膜的制备 将洁净的镀金硅片电极 (1．5cm×lcm)浸人 4mL10mmol／L的L一半