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网络出版时间：2013-12-17 09:36
网络出版地址：/kcms/doi/10.11844/cjcb.2014.01.0283.html
中国细胞生物学学报 Chinese Journal of Cell Biology 2013, 36(1): DOI: 10.11844/cj cb.2014.01.0283
Oct4 RFP
兔 启动子驱动 基因表达载体的构建及验证
1 2 2 1 1* 2 2*
唐 澜 姜伟华 尹明茹 周小梅 李和平 陈学进 李善刚
1 2
( 东北林业大学野生动物资源学院, 哈尔滨150040; 上海交通大学医学院实验动物科学部, 上海200025)
Oct4
摘要 转录因子OCT4在维持和调控胚胎干细胞的多能性中发挥着重要的作用。 基因启动子驱动
标志蛋白的表达对研究胚胎干细胞多能性和建立iPS细胞有重要意义。由于GFP在慢病毒转染过程中常用作
Oct4
转染标记, 我们计划构建兔 基因启动子(rOct4)驱动红色荧光蛋白表达的载体, 这将有利于兔ES细胞和iPS
RFP
细胞制备的研究。我们通过PCR方法扩增rOct4, 构建了rOct4驱动 基因的表达载体rOct4-RFP 。经转染小
鼠ES细胞验证正确后, 将rOct4-RFP质粒转染兔成纤维细胞系获得rOct4-RFP成纤维细胞系。结果: 经过酶切和
测序验证, 证明rOct4-RFP构建成功, 而且能够在小鼠ES细胞系E 14 中表达细胞红色荧光蛋白, 并受细胞分化状
态的调控。通过脂质体介导的基因转移、抗性筛选和PCR鉴定建立了rOct4-RFP转基因成纤维细胞系。
关键词 兔; rOct4启动子; RFP; 干细胞; 转基因
Construction and Validation of Rabbit Oct4 Promoter-Driven RFP
Expression Vector
1 2 2 1 1*, Chen Xuejin2 2 *
Tang Lan , Jiang Weihua , Yin Mingru , Zhou Xiaomei , Li Heping , Li Shangang
1 2
( College of Wildlife Resources, Northea
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