DNA与蛋白质结合的共振光散射研究及应用.pdfVIP

第 31卷 第 5期 河北大学学报 (自然科学版) Vo1．31NO．5 2011年 9月 JournalofHebeiUniversity (NaturalScienceEdition) Sep．2011 DNA与蛋 白质结合的共振光散射研究及应用 李艳坤 (华北 电力大学 环境科学与212程学院，河北 保定 071003) 摘 要：在 pH 2．21～4．35的Britton—Robinson(BR)缓冲溶液中，脱氧核糖核酸 (DNA)与蛋 白质相互 作用形成复合物 ，引起较 DNA或蛋 白质单独存在时的共振光散射 (RLS)信号的强烈增强．用于分析蛋 白质 与DNA结合的相互作用．实验结果显示：DNA与蛋 白质之 间存在较 强的静 电相互作 用．在最佳实验条件 下，波长 315．0nm处 ，RIS强度的增强与牛血清 白蛋 白(BSA)在 0．05～1．3 g／mL呈 良好的线性关系，检 出限达到纳克级．该方法不需要任何特殊试剂 ，快速 简便，建立了蛋 白质检测分析的新方法，可用于人血清 实际样 品的测 定． 关键词：共振光散射 ；蛋 白质 ；脱氧核糖核酸；相互作用 中图分类号 ：0657．3 文献标志码：A 文章编号 ：1000—1565(2011)05—0502—06 Studyon theCombination ofDNA withProteinbyResonance LightScatteringTechniqueandItsAnalyticalApplication LlYan—kun (CollegeofEnvironmentScienceandEngineering，NorthChinaElectricPower University，Baoding071003，China) Abstract：ProteinsbindDNA toform acomplex，which isbiggerthan DNA orproteins，leading to strongenhancementofresonancelightscattering (RIS)intensity．Basedonthis，thecomplexofproteins withDNA resultsinstrongenhancementofresonancelightscattering (RIS)intensity inaBritton—Rob— inson (BR)buffer (pH 2．21 4．35)．Theexperimentalresultsshowed thestrong electrostaticbinding forcebetweenproteinsandDNA．Undertheopticalconditions，theenhancedRLS intensityat315．0nm wasproportionaltOtheconcentrationofBSA intherangeof0．05—1．3／,g／mI．Thelimitofdetermination forBSA wasobtainedatnanogram leve1．Themethod doesn’tneed anyspecialreagents，and asensitive andconvenientnew analysismethod formicrodetermination ofproteinsisaccordingly established．The methodhasbeenappliedtOtheassayofproteinsinactualhumanserum sample． Keywords：resonancelightscattering；proteins；deoxyribonucleicacid；interaction 蛋 白质、核酸是生物大分子的代表，是生物化学研究的重要对象．蛋 白质与核酸的相互作用是许多生 命活动的重要组成部分，也是分子生物