兔肌腱细胞与成纤维细胞生物学特性研究.pdfVIP

·46 · Ch ine se J R ep arat ive and R econ struct ive Su rg, 1997, V o l 11 ( 1) ·实验研究 · 兔肌腱细胞与成纤维细胞生物学特性研究△ 1 1 2 张前法 　杨志明 　彭文珍 　　摘　要　　为了研究在体外培养条件下, 肌腱细胞与成纤维细胞的生物特性, 按 H en der son 方法作兔肌腱细胞与皮肤成纤维细胞体外培养, 观察细胞形态、贴壁时间及延展时间。采用免疫组 织化学的方法对细胞合成胶原的类型进行了测定。结果表明: 两种细胞未贴壁前均呈圆形, 贴壁后 呈梭形或多角形。成纤维细胞的贴壁时间、延展时间较肌腱细胞快; 贴壁后细胞群体的排列方向, 肌腱细胞群体排列趋于一致、规则, 成纤维细胞排列呈不规则。肌腱细胞合成 型胶原, 成纤维细 胞合成 和 型胶原。根据细胞的贴壁时间、延展时间、排列方向及合成胶原类型, 可以区分肌腱 细胞及成纤维细胞。 关键词　　肌腱细胞　　成纤维细胞　　胶原　　体外培养 　　有关肌腱愈合机制的研究已有很多报道。由于 腱段剪成 1～ 2 mm 3 碎块, 再用上述浓度的胰蛋白酶 在体内的研究受很多因素影响, 因而已有不少的研 及胶原酶消化 1 h , 中止消化后过滤除去碎块, 滤液 以 1 000 离心 10 , 去上清液。下层液用培 究在体外进行。至今对肌腱细胞及成纤维细胞参与 r m in m in 肌腱愈合的机制尚不完全清楚。 自D ehm 197 1 年体 养基洗脱一次, 加培养液, 制成细胞悬液。按细胞计 数 5 ×105 个 接种于培养瓶中培养。 外培养鸡胚肌腱细胞成功以来, 对肌腱细胞的研究 m l 逐步深入, 其生物学特性也逐步被认识。为了探索肌 1. 4　成纤维细胞培养 切取兔背部皮肤 2 ×2 , ’液洗涤后 腱细胞与成纤维细胞在体外培养条件下的生物学特 cm cm H ank s 性, 设计了本实验研究。 剪成 1 mm 3 碎块, 用 0. 25% 胰蛋白酶及 0. 1% 胶原 酶消化 1 h , 中止消化后滤 除组织碎块, 滤液 以 1 000 离心 10 , 于沉淀液中加入培养液, 制 1　材料与方法 r m in m in 成细胞悬液, 按细胞计数 5 ×105 个 接种于培养 1. 1　组织来源 m l 瓶中培养。 切取新西兰白兔后肢屈趾肌腱与背部皮肤。 培养液由 12 培养基加 20% 新生小牛血清, 青 F 1. 2　 12 培养基 F 霉素 100 , 链霉素 100