不同类型静水压对兔软骨细胞表型的影响.pdfVIP

维普资讯 中国中医骨伤科杂志2007年2月第1鲞箜 塑 29 · 基础研究 · 不同类型静水压对兔软骨细胞表型的影响 黄正 傅文或 冯伟 张凤华 朱雅萍 魏立 周琦 袁石福 杜宁。 黄好。 [摘要] 目的：传代和压力负荷都是影响软骨细胞表型的因素 。单层培养 的关节软骨细胞在培养过程 中随着传代逐渐 失去了典型软骨细胞的形态学特征，变得像成纤维细胞 ，而且 II型胶原的分泌减少 ，失去 了软骨细胞特异性 ，即出现 了反 分化Ⅲ 。LeeMS等发现 ，某些机械应力可诱导软骨细胞凋亡 ，改变软骨细胞 的新陈代谢 ，也会导致关节软骨 的退变 。在 适当的应力刺激下，软骨细胞可 以通过调节基质代谢来适应压力，但在过度或持续的应力下软骨细胞就可能产生各种病理 改变口]。本试验将兔软骨细胞放在静水压力负载装 置 中培养 ，并传代，在生理水平 的流体静态压力范 围内(0．1— 15MPa)[施加不同大小的循环静水压 ，以及不同大小的持续静水压 ，观察其对兔软骨细胞损伤和表型的影响。方法 ：试验 组循环加压组分为 0．15MPa、0．5Mpa、1MPa三个小组，对照组为持续加压组 (分为 0．15MPa，0．5MPa，1MPa三个小组) 和常压持续培养组 。用酶消化法获取兔关节软骨细胞 ，在静水压力负载装置 中按照上述分组作普通培养瓶贴壁 的单层培 养 ，并传代 。检测 I型胶原和 II型胶原免疫组化 ，苏木素套核染色，倒置显微镜观察摄影 。以RT—PCR方法检测软骨细 胞 中Proteoglycan，Aggrecan，I型胶原和 II型胶原 mRNA的表达 。结果 ：在循环静水压力下培养 ，软骨细胞有较高的细 胞增殖率 ，II型胶原，Proteoglycan和 Aggrecan等表达增加 。生理水平的循环静水压越高，软骨细胞表型越稳定 。常压持 续培养在第 6代开始 出现表型改变 ；持续静水压力培养 的软骨细胞更早失去软骨细胞 的特有表型，并且持续静水压力越 大，表型改变越早 。结论 ：在生理水平 的静水压范围内一定频率和大小的循环静水压力能维持或促进软骨细胞 的合成分泌 功能 ，有助于软骨细胞特有表 型的稳定 [关键词] 静水压 ；软骨细胞 ；表型；动物实验 [中图分类号] Q813．1 1 [文献标识码] A [文章编号] 1005—0205(2007)02—0029—05 TheEfleet0fDifferentHydrostaticPressure0n theStability0fChondrocytePhenotypein Vitro HUANG Zheng ‘FU W enyu FENG ZHANG Fenghua ZHU Yapin WEfL ZH0 【，Q YUAN Shifu DULing。 HUANGHao。 TheInstituteofOrthopaedics Traumatology，AffiliatedRuiiingHospital， theCollegeofShanhaiJiaoTongUniversity。Shanghai200025，China Abstract Objective：Toinvestigatehow thechondrocytesphenotypeisaffectedbydifferentcyclichydrostaticpressure． M ethods：solatedrabbitchondrocyte