锌对大鼠生长板软骨细胞ZnT-7表达的影响.pdfVIP

中国医科大学学报 第 38卷 第 10期 2OO9年 10月 JournalofChinaMedi(a·lUniversity 、1d．38 No．10 Oct．2OO9 ·727 · 锌对大鼠生长板软骨细胞 ZnT一7表达的影响 初立伟，杨茂伟，于江，王铜浩，李亚伦 (中国医科大学 附属第 一一医院骨科，沈阳 110001) 摘要：目的 研究锌对大鼠生长板软骨细胞锌转移体一7(ZnT一7)表达的影响及其规律 方法 原代培养Wistar大鼠肋生长板软 骨细胞，不同浓度的锌螯合剂TPEN分别处理培养生长板软骨细胞 12h。免疫组化检测生长板软骨细胞特异性 Ⅱ型胶原表 达：免疫荧光技术对znT一7进行定位研究，实时RT—PCR和Westernblot检测 znT．7表达 结果 Ⅱ型胶原免疫组化检测阳性。 znT7在生长板软骨细胞中定位于高尔基体上；Westernblot和 RT—PCR结果显示；5Ixraol／L(TPEN)组与对照组相 比略有增高， 而 10txm01／L、20 n1oI，I．组与对照组相比逐渐降低：结论 ZnT一7定位于高尔基体上，同时在缺锌的条件下其对锌离子稳定有 一 定的代偿作用 关键词：锌；生长板软骨细胞；锌转移体 中图分类号：R681．3 文献标志码：A 文章编号：0258—4646(2009)10—0727—03 EffortsofZincontheExpressionofZnT-7inGrowthPlateChondrocytes CHULi·wei，YANGMao—wei，YUJiang，WANGTong-hao，U Ya—lun (DepaltmentofOrthopedic，FheFirstMlqliatedHospit-,d，ChinaMedicalUniversity，Shenyang110001，China) Abstract：Objective Tostud?,hteeffectsnfzinconhteexpressionofzinctrnasporter一7(ZnT一7)intheproliferationofthemtgrowthplate chondr~Ttes．Methods Growthplateehondroeyteswerei~latedfrom ribcartilageofWistarrat．The(tellsweretreated h【zincchelating agentN，N，N ，N-tetrakis (2-pyridylmehty1)ethylene—diamine (nEN)ofdifferenteoneentmtion (0，5，10and20xImol／L)f0r12hours． Th eexpressionofFatgrovelplatechond~ ytesspecificitycollagenLype I1wasdetectedbyiramunohistochemistty．Th el(malizationofZnT-7 wascheckedb、’immunofluom~,entstaining．Real—timeRT—PCR andWestern blotwereusedtomeasuretheexpressionlevelofZNT一7inhte cel1．Results Fheresultoftheinmmnofluore~．enceshowedhtatZnT一7l~atedinhteGolgiapparatus．Th eexpressionlevelofZnT-7was slightlyhigherinhtecellstreated t}l5xImoI／LTPEN htanhtecontrolgroup．whileitwaslowerinthecellsIreatedwith 10or20 xImol／L TPEN htna thecontrolgroup．Conclusion ZnT一7loeatesinGo~giapparatusandmaintainsthezincionsrabilizationintheconditionofhte zincdepletion． Keywords：zin(’；growthplatechondroeytes；zinctransporter 锌缺乏会使机体的代谢平衡受到破坏，从而影 1 材料与方法 响其他营养素(包括微量元素