自制光化学衍生反应器测定食品中的黄曲霉毒素.docVIP

自制光化学衍生反应器测定食品中的黄曲霉毒素B1 范海东1 王玲锋2 赵冬吉2 （1.海宁市计量检定测试所 2.海宁市产品质量监督检验所 314400） 摘 要：黄曲霉毒素B1具有极强的毒性，是已知的强致癌物质之一。本文试通过黄曲霉毒素B1光化学原理，自制光化学衍生反应器，结合HPLC-FLD对食品中黄曲霉毒素B1进行检测，检出限可达到0.2ug/L。同时其制作成本远低于市售光化学衍生反应器。 关健词：光化学衍生 黄曲霉毒素B1 高效液相色谱 DIY Photochemical Derivative Reactor for The Determination of Aflatoxin B1 in Foods FANHAIDONG1 WANGLINGFENG2 ZHAODONGJI2 （1. HaiNing Institute of Verification and Testing 2. HaiNing Product Quality Supervision and Testing Institute） Abstract: Aflatoxin B1 has a strong toxicity which is one of the strongest carcinogens in the world. This paper tries to aflatoxin B1 photochemical principle, derived from DIY photochemical reactor, combined with HPLC-FLD detection of aflatoxin B1 in foods, detection limits is 0.2ug/L.The production costs of the DIY is less than commercial photochemical derivatization reactor. Keywords: Photochemical Derivative Reactor Aflatoxin B1 HPLC 0、引言 黄曲霉毒素具有很强的毒性，是已知的强致癌物质之一。它是由黄曲霉和寄生曲霉的代谢产物，广泛存在于自然界中，它们是一类具有相似结构的二氢呋喃杂氧萘的衍生物。而黄曲霉毒素B1其毒性最强，具有极强的的毒性和强致癌性，我国在食品安全国家标准[1]中规定了各类食品中黄曲霉毒素B1的限量值。 目前对食品中黄曲霉毒素B1的检测方法[2] [3] [5]有薄层色谱法、酶联免疫吸附法、柱前衍生（I2）高效液相色谱荧光法、柱前衍生（TFA）高效液相色谱荧光法、柱后衍生（I2）高效液相色谱荧光法以及柱后衍生（光化学）高效液相色谱荧光法等几种方法。当采用高效液相色谱荧光法进行检测时，由于黄曲霉毒素B1在水溶液中会产生荧光淬灭现象，因此需要对其进行衍生化，以增加其荧光强度，提高检测灵敏度。 本文根据其原理[3]自制光化学衍生反应 收稿日期：2012-5-31 修订日期 2013-05-06 作者简介：范海东（1975—），男，浙江海宁人，海宁市计量检定测试所 工程师 器，结合高效液相色谱荧光法对黄曲霉毒素B1进行检测，并对自制光化学衍生反应器的线性和检出限、测量重复性、稳定性进行试验，试验结果良好，能满足正常使用要求且价格低廉。 1、材料与方法 1.1 原理 光化学衍生反应器主要包括反应线圈、紫外灯、反应池架构成，根据《食品中黄曲毒素检验法》[3]，其基本原理是将一定长度的聚四氟乙烯管（内径为0.30mm）编织成长方形并固定于254nm紫外灯照射的不透光的反应池架中，当带有黄曲霉毒素B1的流过反应线圈时，受到紫外光照射后被衍生成荧光性较强的黄曲霉毒素B2α,从而提高了检测灵敏度。原理见下图1 图1 黄曲霉毒素B1紫外光照射原理图 Fig.1 aflatoxin B1 UV irradiation schematic 1.2材料与仪器 Agilent 1200系列液相色谱仪及工作站（美国安捷伦公司），配自动进样器、 在线脱气机、恒温柱温箱、荧光检测器） Pickering Vector PCX柱后衍生系统 黄曲霉毒素B1标样 GBW(E)090015a 国家粮食局科学研究院 黄曲霉毒素B1 标准工作液：10ng/mL，取黄曲霉毒素B1标样 GBW(E)090015a，用甲醇多次稀释得到。在2-8℃下可保存3个月 聚四氟乙烯管(PTFE)30S,21S UVC254nm紫外灯(PHILIPS TUV 8W)带灯架 1/16″PEEK手紧接头 定制的反应池架 市售一级大豆油 去离子水 甲醇和乙腈为色谱纯 试验所用其他试剂均为分析纯 1.3光化学衍生反