电化学发光法测定人尿液中2,3-吲哚醌含量.pdfVIP

第 26卷 第 3期 青 岛大 学 学报 (工 程 技 术 版 ) VoI_26NO．3 2011年 9月 JOURNALOFQINGDAOUNIVERSITY (ET) Sep．2 0 1 1 文章编号 ：1006—9798(2o11)03 0078—04 电化学发光法测定人尿液中2，3一吲哚醌含量 倪倍倍，毛晓红，李增智，牟群芳，李 静 ，王立萍，岳 旺 (青岛大学医学院，山东 青岛266021) 摘要 ：基于 2，3一吲哚醌对光泽精电化学发光 的增强作用 ，建立 了电化学发光法测定 2，3 一 吲哚醌浓度。对人尿液 中2，3 吲哚醌含量进行检测 ，结果显示 ，线性检测范围为 9．0× 10 ～1．0×10 g／mL，回收率为 81．7 ～1l0．1 。说 明电化学发光法可测定人尿液 中 2，3一吲哚醌 的含量 ，线性 良好 。 关键词 ：2，3一吲哚醌 ；电化学发光法；光泽精 中图分类号 ：O657．1；R446．122 文献标识码 ：A 2，3一吲哚醌 (isatin，IsA)，是海洋生物龙虾生存的必需物质 ，也是人体老化酶单胺氧化酶 B(MAO B) 抑制因子 ，具有抗衰老活性_l】]。Glover等[2在人类尿液 中首次发现 2，3一吲哚醌。尿液中 2，3一吲哚醌质量 浓度异常变化涉及衰老性疾病 ，如帕金森氏病 ]、癌症__4等。 目前 ，测定体液 中ISA浓度 的方法有液相色谱 质谱联用 、高效液相色谱法 (HPLC)_6等 ，但仪器昂贵，操作复杂 。因此 ，建立一种准确 、快速 、简便 、高效 的方法显得尤为重要 。本研究拟建立测定尿液中 2，3一吲哚醌质量浓度的电化学发光法 (ECI)，测定人尿液 中 2，3一吲哚醌含量 。 1 实验部分 1．1 仪器与试剂 1．1．1 仪器 MPI B型多参数化学分析测试系统 ，西安瑞迈分析仪器有限公司 ；DHG一9053A型电热恒温鼓风干燥 箱 ，上海精宏实验设备有限公司 ；saitorius电子天平 ，北京赛多利斯仪器 系统有限公司 ；CHI830B电化学T 作站 ，上海辰华仪器有限公司；三电极系统 ：铂电极 (PT，直径 1．0ram)为工作电极 ，Ag／AgC1电极为参比电 极 ，铂丝 电极为辅助电极 ；pHS一3C型精密 pH 计，上海三信仪表厂；BRAN SONIC200超声清洗仪 ，德 国 BRANSONUITRASCHAII公司 ；电热恒温水浴锅 ，天津市泰斯特仪器有限公司；离心机 ，上海安亭科学仪 器 。 1．1．2 试剂 2，3一吲哚醌 (isatin，ISA)，武汉盛世精细化学品有 限公司 ；光泽精 (1ucigenin，IG)，日本东京 成工业 株式会社 ；0．02mol／I磷酸盐缓冲溶液 (PBS)由KH。PO 和K HPO 配制 。试剂均为分析纯 ，实验用水为超 纯水 (l7MQcm)。 1．2 储备液配制 光泽精储备液 (1．0×10 mol／L)配制：准确称取 5．1mg光泽精 ，水定容至 100mL棕色容量瓶 中，4℃ 保存 。使用时用缓冲溶液稀释至所需浓度 。 收稿 日期 ：2O1l一06—03 基金项 目：国家重大专项基金资助项 目(2009ZX09102—050) 作者简介 ：~NN (1988一)，女 ，山东济宁人 ，硕士研究生 ，研究方 向为神经药理学 。 通讯作者 ：岳旺(1956 )，男 ，河北沧州人 ，教授 ，lg~ ，研究方 向为神经药理学 。 第 3期 倪倍倍 ，等 ：电化学发光法测定人尿液中2，3一吲哚醌含量 79 2，3一吲哚醌储备液 (1．0X10 g／mL)配制：准确称取 10mg2，3一吲哚醌 ，加入少许水 ，使用恒温水浴 锅加热至完全溶解 ，冷却后转入 100mL棕色容量瓶 中，4℃保存 。使用时用缓冲溶液稀释至所需浓度。