鸡蛋清溶菌酶的简易制备方法研究.pdfVIP

畜牧与饲料科学 , : ?鸡蛋清溶菌酶的简易制备方法研究 康 旭,邓 川,袁江兰,吴正奇 湖北工业大学生物工程学院,湖北 武汉 摘要:建立了一种简单有效的提纯鸡蛋清溶茵酶的方法,制备出的鸡蛋清溶茵酶纯度较高。具体方法为:用 值为 . 的磷酸盐缓冲液稀释蛋清 倍,搅拌,然后调 值至 . ,加热至 ℃并保温,冷却后离心,上清 液进行硫酸铵分级沉淀,取 %~ %饱和度部分的沉淀,即为溶菌酶,其纯度达到电泳纯。 关键词:鸡蛋清;溶菌酶;制备 中图分类号:. 文献标识码: 文章顺序编号: ? ? ?, , ? , ?, , , : ..: ; . ;; . ;。;; .%% ? . 引 :;; 溶菌酶又称为胞壁质酶,能选择性地分解微生物细 蛋清含量最为丰富,含量达到 . % 。近年来,溶菌酶来 胞壁成分,因此具有良好的杀菌抑菌作用,是一种无毒、 源不足,价格不断上涨,禽蛋加工企业在生产加工过程中 无害、安全性很高的生物防腐剂,在食品领域受到广泛关 产生大量的破损蛋、废蛋清、蛋壳等,利用这些物料提取 注。溶菌酶还可与带负电荷的病毒蛋白直接结合,使病 溶菌酶不仅可以很大程度地提高企业的经济效益、增加 毒失活,因而又具有抗病毒作用,在生物、医学等研究和 禽蛋加工产品的附加值。而且可以缓解市场溶菌酶供应 应用领域具有广泛用途。溶菌酶存在于蛋清、哺乳动物 不足的局面。鸡蛋清溶菌酶的提纯方法已有大量报道, 的泪、唾液、血浆、尿、乳汁等体液以及微生物中,其中以 该研究进一步简化提纯工艺,建立一种简便易行、成本低 廉的高纯度溶菌酶提纯方法.为溶菌酶的进一步研究和 收稿日期: ? ?‘ 生产应用提供方法参考。 基金项目:湖北省教育厅基金项目 。 材料与试剂 作者简介:康旭 一 ,男,讲师,硕士,主要研究方向为食品 新鲜鸡蛋购于市场:溶菌酶标准品为国产生物试剂: 生物技术 氯化钠、氢氧化钠、磷酸二氢钠、硫酸铵、甲醇、溴酚蓝、 通讯作者:袁江兰 一 ,女,副教授,博士,主要研究方向为 、 %乙醇等均为国产分析纯试剂:聚乙二醇 食品生物技术 ?『. 出鱼片和鱼丸中加入海藻糖复配抗冻剂的保鲜效果很好。 ,, : ? . 但草鱼和罗非鱼的肌肉组织有所差异.因此,经海藻糖处理 黄日波,蒙健宗,陈宇,等.海藻糖?? 世纪新型糖类 后.草鱼片的解冻失水率和加热失重率比罗非鱼片少得多。 『 .北京:化学工业出版社,. 而罗非鱼丸加入海藻糖效果则比草鱼丸的效果要好。因此 下村武生.海藻糖在冷冻鱼酱中的应用 .日本食品科 当以 %海藻糖、. %碳酸钠和 .%乳化剂复配成的抗冻 学, : ? . 齐向辉,陈华友,蒙健宗,等.海藻糖在生物组织器官保 剂对草鱼和罗非鱼鱼片和鱼丸进行处理后,能得到较好的 护方面的新应用.安徽农业科学, , : 保鲜效果.并且避免了人们食用经过传统复合抗冻剂含有? . 磷酸盐处理过的鱼类产品时,由于摄入太多的磷酸盐而影 李桂芹.海藻糖的生物学功能及其应用『 .安徽农业科 响对钙质吸收的缺点。下一步还可将该文所配置的新型复 学, , :. 合抗冻剂应用到其他鱼类产品中,以观察其效果。 李汴生,朱志伟,阮征,等.不同温度冻藏对脆肉鲩鱼片 品质的影响 .华南理工大学学报:自然科学版, , 参考文献:: . 蒙健宗,赵文报.海藻糖的性质及其在新型食品开发中的 . . 应用 .食品科学, , :?. . 聂凌鸿,宁正祥.海藻糖的生物保护作用 .生命的化学, , :?. , :?. .. . 邵引刚,李峰,孙辉,等.海藻糖的应用及基因工程研究 // .:.安徽农业科学, , :?. . :, : 一 .口 ,,, .畜牧与饲料科学 第 卷 为 产品;丙烯酰胺、 一 一甲又双丙烯酰胺、三羟 促进溶菌酶和卵蛋白之间的结合。有研究报道溶菌酶在酸 基氨基甲烷、甘氨酸、 为产品;为 性条件下化学性质稳定,因此,选用 值为 . 、稀释 倍产品。 条件下的蛋清做以下的分离提纯实验。 仪器 . 等电点沉淀法和盐析沉淀法提纯溶菌酶的效果 从一 智能高速冷冻离心机、 ? 型恒温磁力搅拌 图 可以看出盐析 %饱和度的样品可以析出的溶菌酶中 器、离心机、? 分析实验室专用纯水机、 含有少量的卵蛋白.而盐析 %饱和度的样品则没有析出?垂直电泳仪。 溶菌酶,等电点沉淀法得到的样品中没有蛋白质沉淀析出。 试验内容和方法 说明盐析 %饱和度时溶菌酶在水中的溶解度降低可以使 . 溶茵酶纯度的测定 采用 法,按照参考文献 得大部分的溶菌酶沉淀析出。而盐析 %饱和度时溶菌酶 进行操作,浓缩胶浓度 %,分离胶浓度 %。 的溶解度仍然很大,不能使溶菌酶沉淀析出,需要加大硫酸 . 鸡蛋清溶菌酶提取的 值选