下呼吸道感染患儿150例肺炎支原体检测结果分析.pdfVIP

2o12年 12月第19卷第 17期 下呼吸道感染患儿150例肺炎支原体检测结果分析 邵利姣 【摘要】 目的 了解下呼吸道肺炎支原体(MP)感染的临床特征。方法 分别采用聚合酶链反应(PCR)和血清学ELISA 法，对我院的下呼吸道感染患儿 l50例进行MP检测。并按MP阳性与阴性进行临床资料的分组 比较。结果 MP阳性 40例：PCR检测阳性25例，血清学检测阳性35例，其中20例两种检测方法均阳性。分组比较：除有湿哕音 、干咳与 有支气管肺炎患者的MP阳性率高于无湿哕音 、无干咳与无支气管肺炎患者，差异有统计学意义外，余各项临床特征MP 阳性组与阴性组 比较 ，差异均无统计学意义。结论 PCR和 ELISA两种方法应联合应用可明显提高MP检测阳性率， 有助于临床的早期、合理用药。 【关键词】 下呼吸道感染；肺炎支原体；聚合酶链反应；特异性抗体检测 肺炎支原体(MP)是儿童呼吸道感染的重要病原体之一， 2 方法 其引起的支原体肺炎 占社区获得性肺炎的 15％～20％tI。 入院24h内用一次性吸痰管送入患儿鼻腔5～l0cm， MP对下呼吸道感染常规经验性治疗药物一一 p内酰胺类 利用负压吸取痰液标本备用。 抗生素不敏感，对大环内酯类抗生素敏感。所以快速有效 2．1 检测方法 的诊断 MP感染对治疗 MP肺炎有很重要的临床意义。目 2．1．1 MP—DNA—PCR测定 痰液标本经震荡、离心、 前，在金华兰溪地区尚无 MP感染引起的儿童下呼吸道感 去上清，再加入裂解液提取DNA，再进行PCR扩增 ，引物 染患病率的一个明确统计数据。本研究旨在通过采用血清 及探针来自于广州达安基因股份有限公司。探针结合序列位 学ELISA法和聚合酶链反应(PCR)检测方法 了解 MP在 于上游引物与下游引物之间。在特异性杂交荧光探针的5’ 金华兰溪地区的流行情况。 端结合荧光发光基团(FAM)，3’端结合荧光吸收基团 1 临床资料 (TAMRA)，将样品(标本和质控品)上清液 2 l或直接加入 1．1 诊断标准 参照 诸福棠实用儿科学》第 7版中MP 阳性定量参考品于反应管中，8000r／min离心5min，离心 感染诊断标准 ：①持续剧烈咳嗽，x线胸片可见肺部斑点 半径 9．5cm。循环温度设置 ：93℃ 2min一93℃45s一 状或斑片状或大片阴影 ；②有全身症状、体征 ；③外周血 55℃ 60s，10个循环 ；93℃ 30s一 55℃ 45S，30个循 白细胞计数正常或稍增高；④血清 MP—IgM 阳性 ，或者 环。仪器使用美国伯乐荧光定量 PCR扩增仪 iCyCler。荧 IgG滴度≥4倍增高，或者 MP—DNA—PCR测定阳性。 光定量 PCR的结果以Ct值显示，反应结束 电脑 自动分析 1．2 一般资料 20l0年 5月 1日至20l1年4月30日， 结果。 兰溪人民医院诊断为下呼吸道感染的 150例患儿。其中支 根据质控品所得数据分析并调节基线起始值和阈值，使 气管肺炎 89例(59．3％)，过度充气 17例 (11．3％)，支气 标准曲线图达到最佳 ，线性相关系数r0．97。结果判定： 管肺炎并过度充气 I3例 (8．7％)，肺实变 18例 (12．0％)， ①如果增长曲线不呈 S型或 ct值≥30，则判样品的MP 肺实变并胸腔积液 13例(8．7％)。年龄 ：6个月至 12岁， DNA含量小于检测极限，结果为阴性。②如果增长曲线呈 其中≤5岁 126例(84．0％)，5岁 24例(16．0％)。性别： S型且 Ct值 30，结果为阳性。 男85例 (56．7％)，女65例(43．3％)。干咳 127例 (84．7％)， 2．1．2 MP特异性抗体检测(ELISA) 取患者血清 l0l， 流涕79例 (52．7％)，喘息60例(40．0％)．肺部湿哕音 109 IgM、IgG分别以 1：100和 1：20稀释，加入每孔 8抗 例 (72．7％)，干哕音96例(64．0％)。