高效液相色谱法测定棉籽提取物中总黄酮醇苷的含量.pdfVIP

第 27卷增刊 分析试验室 Vo1．27．Supp1． 2008年 l2月 ChineseJournalofAnalysisLaboratory 2008—12 高效液相色谱法测定棉籽提取物中总黄酮醇苷的含量 阎 平 ，李江利 ，谢剑炜 (1．军事医学科学院毒物药物研究所，北京 100850；2．武警8690部队医院，宜兴214206) 摘 要：建立棉子 中总黄酮醇苷含量的HPLC测定方法。样品用 (甲醇)： (25％HC1)=4：1的混合液经9o℃热水浴处理，采用HPLC法测定总黄酮醇苷 含量。选用迪马 C。。色谱柱 ，以 (甲醇)：v(0．4％ P04)=60：40为流动相，检 测波长为360砌。结果：以槲皮素、山奈素为对照品计算，棉子中总黄酮醇苷 平均回收率为98．8％，RSD为2．6％。方法可用于棉子中总黄酮提取物含量的 测定。 关键词：棉籽总黄酮醇苷；含量测定；高效液相色谱法 棉籽提取物中主要成分为总黄酮醇苷，是槲 2．2 对照品溶液的制备 皮素．3．0芹菜糖．(1—2)．鼠李糖一(1—6)一葡萄糖苷 精密称取槲皮素和山柰素对照品适量，用 甲 和山柰素-3_0芹菜糖一(1—2)一鼠李糖一(1—6)．葡萄 醇配制成槲皮素0．03mg／mL和山柰素O．01mg／mL 糖苷的结合物。它的主要作用为舒张冠脉、改善 的溶液，摇匀，即得。 微循环、抗血栓，对心脑血管具有保护作用。本文 2．3 供试品溶液的制备 参考中国药典和文献资料 l【]，经多种条件试验 ， 精密称取棉籽提取物样品25mg置25rnL量 建立了ItPLC方法测定棉籽提取物中总黄酮醇苷 瓶，用 (甲醇)：v(25％HC1)=4：1混合液溶解并 的含量，由于样品为多种黄酮的混合物，含量采 加至刻度，摇匀。吸取上述溶液2mL置 10mL量 用酸解法测定槲皮素和山柰素原形，结果表明方 瓶，加混合液5mL，在水浴90±2aC条件下放置 法专属性强，重现性好，操作简便，可用于棉子中 30min，取出，置水中冷却至室温，加甲醇至刻度， 总黄酮提取物含量的测定。 摇匀，即得 。 1 实验部分 2．4 专属性试验 1．1 仪器与试剂 在此色谱条件下，样品中的槲皮素和山柰素 AgilentHP1100型HPLC色谱仪，HPll00色谱 能较好地分离，见色谱图1。 工作站；棉籽提取物样品为本所植化室提供。槲 2．5 标准 曲线的制备 皮素、山柰素对照品均购于中国药品生物制品检 分别精密称取槲皮素和山柰素对照品各 1Omg 定所，甲醇和H3PO4均为分析纯。 置于 10mL量瓶中，用甲醇稀释至刻度。再分别稀 2 结果与讨论 释成浓度为槲皮素5、l0、20、3O、40t,-g／~ 和山柰 2．1 色谱条件 素2、5、1O、20、30teCmL的对照品溶液。进样 ， 色谱柱：迪马．CI8(4．6otnix250ITII／I，5／．an)； 测定，以峰面积()与浓度 ( 作回归曲线，线性 流动相：V(甲醇)：v(0．4％H104溶液)=60：40； 范围分别为：槲皮素5 40 t-,g／mL；山柰素2～30 流速：IinL／min；检测波长：360nin，进样量 20 t,#mL，回归方程：槲皮素 Y=71124X一794，r= 。