丹参提取物4种有效成分含量的测定.pdfVIP

第2O卷 第4期 洛阳理工学院学报(自然科学版) V01．20 No．4 2010年 12月 JournalofLuoyangInstituteofScienceandTechnology(NaturalScienceEdition) Dec．2010 丹参提取物4种有效成分含量的测定 王万慧 ，胡 骥。 (1．洛阳理工学院环境工程与化学系，河南洛阳471023；2．洛阳理工学院材料科学与工程系，河南洛阳471023) 摘 要：建立了丹参提取物中丹参酮IIA、丹参HI、隐丹参酮、二氢丹参酮等4种脂溶性成分含量的HPLCg~]定方 法。研究了不同流动相、最佳波长等操作因素对含量测定的影响。色谱条件：色谱柱AgjlentZorbaxSB-G f4．6inln× 250mm，5 m1，流动相为甲醇水缌I生梯度洗脱，检测波长为270am，流速为0．9mL·min。。结果表明丹参酮IIA、 丹参酮I、隐丹参酮、二氢丹参酮线性关系良好，说明该方法操作简便、灵敏度高、重复性好。 关键词：丹参提取物；HPLC；含量测定 DOI：10．3969／i．issn．1674-5043．2010．04．003 中图分类号：0629 文献标志码：A 文章编号：1674—5043(2010)04—0007．03 丹参为唇形科植物丹参(SalviamiltiorrhizaBunRe)的干燥根及根茎。其味苦，微寒，归心、肝经。具 有祛淤止痛，活血通经，清心除烦之功效 J。丹参化学成分主要为脂溶性丹参酮类和水溶性酚酸类 。其脂 溶性化学成分主要包括丹参酮i、丹参酮IIA、隐丹参酮和二氢丹参酮等，均具有保护心肌缺血缺氧、抑 制血小板聚集的功能，还具有 明显的抗肿瘤作用。其水溶性成份主要为丹酚酸、原儿茶醛等丹酚酸类化 合物，药理研究表 明丹参酚酸类成分具有抗血小板聚集、抗血栓形成、改善微循环、抗氧化损伤和心肌 保护等作用口J。 有关丹参提取物的报道p多为药理作用和含量测定方法的研究，但同时测定4种脂溶性有效成分含量 的报道较为少见。本文 以4种脂溶性成分丹参酮I、丹参酮IIA、隐丹参酮和二氢丹参酮为特征指标，通过 优选HPLC梯度洗脱程序，建立了丹参提取物测定4种有效成分含量的方法。 1 实验部分 1．1 仪器与试剂 ARilentHPI100高效液相色谱仪；在线脱气机；四元泵；自动进样器 ；DAD检测器 ；ARilent色谱工 作站；s．A67120纯水机(MILLIPORE)；D．78224超声仪(ELMA)；分析天平(MILLIPORE)。甲醇、乙腈 为色谱纯(Merck公司)，其他试剂均为分析纯。 1．2 样 品 丹参酮IIA(110766—200416)、隐丹参酮(111562—2003027、丹参酮I、二氢丹参酮化学对照品由洛阳梓生 科技开发有限公司提供。12批丹参提取物由洛阳梓生科技开发有限公司提供。 1．3 实验条件 1．3．1 色谱条件 色谱柱ARilentZorbaxSB—Cl8r4．6mIll×250mill，5 m)；流动相为 甲醇(At水(B)线性梯度洗脱， 0min：55％A，55min：80％A，70min：80％A；流速0．9mL ·min～；进样量2OuL；柱温3O℃：检测 波长270nm。在选定条件下，丹参酮IIA、丹参酮l、隐丹参酮、二氢丹参酮和样品中其他组分色谱峰可 达基线分离，且与其他相邻色谱峰分离度大于1。其色谱图如图1所示 。 1．3．2 样品溶液制备 取提取物粉末适量，加入 甲醇溶解，制成0．1mR／mL的溶液，经0．45uin的微孔滤膜过滤待用。 收稿 日期：2010—09-14 作者简介：王万慧(1981一)，女，河南洛阳人，硕士，助教，主要从事中药有效成分提取分离方面的研究． 基金项目：洛阳理工学院青年基金 2《O08Qzl4)． 8 洛阳理工学院学报(自然科学版) 第2O卷 f／min 图1 丹参提取物HPLC图 1．3．3 对照品溶液制备 取丹参酮IIA、丹参酮I