农杆菌介导的大豆胚尖遗传转化体系中基因型的选择及抑菌条件的优化.pdfVIP

第 29卷第 2期 上 海 交 通 大 学 学报 (农 业科 学 版) Vo1．29No．2 2012年 4月 J0URNAL0FSHANGHAIJIAOTONGUNIVERslTY (AGRICULTURALSCIENCE) Apr．2012 文章编号 ：1671—9964(2012)020024—04 DOI：10．3969／J．ISSN．1671—9964．2012．02．005 农杆菌介导的大豆胚尖遗传转化体系中基因型的 选择及抑菌条件的优化 虞 薇，杜 鹃，贾光蕾，曹越平 (Jk海交通大学 农业与生物学院，上海 200240) 摘 要：大豆基因型对农杆菌介导大豆胚尖遗传转化体系的转化效率有很大影响，同时有效地抑 制农杆菌是该体系的重要环节。研究选择 3个东北地区主栽的大豆品种，以胚尖为外植体进行农 杆菌介导的遗传转化，比较 3个大豆品种的诱导率、伸长率和生根率，并在芽诱导、伸长及生根阶段 采用不同的抗生素浓度配比，优化抑茵条件。实验结果表明3个品种中，黑农 37为最佳受体品种； 抗生素浓度对大豆胚尖遗传转化有很大影响。在芽诱导和伸长阶段添加头孢霉素300mg／L+羧 苄青霉素 150mg／L抑菌效果较好 ；而在生根过程 中，不添加抗生素为最佳条件 。 关键词：大豆；胚尖；转化；基因型；抑菌 中图分类号 ：$565．1 文献标识码 ：A ScreeningofGenotypeandOptimizationoftheBacteriostaticCondition inAgrobacterium—MediatedSoybeanTransformationofEmbryonicTips y Wei，DUJuan，JIAGuang-lei，CAOYue-ping (SchoolofAgricultureandBiology，ShanghaiJiaotongUniversity，Shanghai200240，China) Abstract：Genotypeisoneofthefactorsaffectingtheefficientofsoybean transformation，and effective bacteriostasisiSveryimportantpointin theAgrobacterium-mediatedtransformation．Overuseofantibiotic willcausethesuppressionininduction，elongationandrooting．WeusedtheembryonictipsofHeinong37， Hefeng35andDongnong42asexplantsandobtainedtherateofinduction，elongationandrooting，which were treated with differentratio and concentration of cephalosporin (Cef) and carbenicillin (Cb) combination．TheresultsindicatedthatHeinong37wasthebestreceptorand300mg／LofCef+ 150rag／ LofCbhadbetterbacteriostaticeffectsinthestageofbudinductionandgrowth，butit’Soptimalwithout antibioticinrootingperiod． Keywords：soybean；transformation；embryonictips；geneotype；bacteriostasis 大豆的遗传转化方法主要采用农杆菌介导法。 简便、周期短、重复性好的优点。目前用农杆菌介导 常用的外植体有子叶节 、下胚轴、胚尖 。’。。等。以 大豆的胚尖再生系统已获得转GUS基因、双价抗虫 胚尖为外植体的大豆再生体系具有再生率高、操作 基因的转基因大豆植株 捌。